（优质课件）串联质谱技术在新生儿筛查上的应用.pptVIP

sample plate sample plate Laser sample plate + + * MALDI与其他的电离方式不同，样本在基质的保护下几乎不受伤害。 基质在激光的照射下吸收了激光的能量，电离气化，样本接受了基质电离放出的质子从而带电，这样样本分子在基质气相的包裹下，进入下一步骤。 使用MALDI电离出的生物大分子是真正“活”着的生物大分子。 * 应 用 因MALTI-TOF-MS具有的检测位点多 、覆盖率高 、高通量等特点 ，无锡市妇幼保健医院已经为新生儿筛查应用此技术做出了试验。医院选择了 2796 例新生儿为研究对象 ， 采集足跟血并 提取基 因组 D N A ，针对 中国人群特 点 ，进行 4 个基 因( GJB2 ， C JB3 ， SLC26A 4和 12s rR N A ) 20 个 突变位点 的基 因突变检测 ，先通过PCR扩增出目的基因片段，然后通过飞行时间质谱检测，检 出耳聋基 因突变新生儿 158 例 ， 携带率为 5． 65％ 。由此可证明M A LDI—TO F—M S 对非综合征型耳聋患者的突变 检 出率 较高 。   * 虽然该技术具有高效 、快速、判读简易和准确性高的检测特点，有望成为一种极具潜力 的耳聋基因诊断和筛查工具 ，但成本相对较高 ，且不能检测到其他未知突变 ，所以有所局限，但在其他领域有广泛应用，如质量检测方向的蛋白、肽链的检测，还有DNA探针、引物的鉴定，检测。  * 引用文章 无锡地 区新生儿耳聋基 因的 M A LD I．TO F．M S筛查分 析 --------中华检验医学杂志2015年2月 基于质谱的D NA 序列测定进展 -------化学通报2000年2期 串联质谱技术在新生儿遗传代谢性疾病筛查中的应用 --------山东省济南市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心 250001 岛津串联质谱技术在新生儿筛查中的应用 ----------0407应用文章医学检验应用文集 * * * 串联质谱技术 在新生儿筛查方面的应用 * 新生儿筛查的必要性 ? 遗传代谢病多是罕见病，种类繁多，约4000种，常见的500种以上，单一病种发病率低, 总体发病率1/3000-5000? 新生儿筛查： 及早治疗可预防疾病的发作，减轻症状提高患儿生存质量，减少伤残? 产前诊断： 预防残疾儿童的出生，提高出生人口素质? 临床筛查及诊断：明确诊断，减轻症状，挽救生命，减少医疗纠纷  * 串联质谱技术的优势 ? 特异性：检测分子量，内标定量显著降低假阳性率 ? 敏感性：明显降低假阴性率 ? 高通量：一次可以检测几十种小分子物质（ 30-50多种疾病），一台仪器每天检测500～600个样品，每个标本2-3分钟 ? 采血简单，可以寄送  * 串联质谱能筛查哪些疾病  ? 氨基酸—氨基酸障碍疾病? 酰基肉碱—有机酸及脂肪酸代谢障碍疾病? 溶酶体病及脑白质营养不良? SCID（重症联合免疫缺陷）比较成熟? 临床应用范围不断扩大 ? 半乳糖血症、糖原累积症、 Wilson病及线粒体脑肌病等等不能筛查  * * 测定方法 目前使用 LCMSMS 技术主要检测的氨基酸及酰基肉碱，可分别作为氨基酸代谢异常、脂肪酸代谢异常和有机酸代谢异常等疾病的判断指征  检测目标 对应代谢疾病类型 氨基酸 氨基酸代谢异常 酰基肉碱 脂肪酸代谢异常有机酸代谢异常 * 前处理方法 一般 LCMSMS 新生儿筛查血片的前处理方法可根据是否进行衍生化反应分为衍生化法和非衍生化法两大类，两种前处理方法在各实验室或检测机构均有使用，具体操作细节可能有所不同，其大致流程如下 衍生化法 * 原材料采购与初加工部门 生产产品的车间 动力供应部门 4 2 3