病理切片的制作过程.pdfVIP

. 1.7.1 修整组织 将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面， 各组织块不宜太大， 以便固定剂穿 透和组织脱水等操作，通常以 10 mm×10 mm×3mm或 5mm×5mm×3mm为宜。找到 不同的部位切取 2 块，以备后用。 1.7.2 组织洗涤 组织经修整后， 组织中的福尔马林等必须冲洗干净， 尤其是含有重金属的物 质存在。 因为残留在组织中的福尔马林， 有的不利于染色， 有的产生沉淀或结晶 影响观察，所以组织修整后应冲洗 12h 左右。 1.7.3 组织脱水 组织经洗涤后， 组织中含有大量水分， 由于水与石蜡不能互溶， 所以必须将 组织中的水分除去。 80%乙醇溶液： 2h 95%乙醇溶液 :1h 95%乙醇溶液 :1h 100%乙醇溶液 :30min 100%乙醇溶液 :30min 1.7.4 组织透明 由于乙醇与石蜡不相溶， 而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡， 所以脱水后 还要经过二甲苯以过渡。 当组织中全部被二甲苯占有时， 光线可以透过， 组织呈 现出不同程度的透明状态。 二甲苯Ⅰ： 30min 二甲苯Ⅱ： 10min 1.7.5 组织浸蜡 浸蜡的目的是除去组织中的透明剂（如二甲苯等） ，使石蜡渗透到组织内部 达到饱和程度以便组织包埋。浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长，需 3h 左右。 浸蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在 55℃左右，注意温度不要过高，以 免组织发脆。 石蜡Ⅰ： 1h . . 石蜡Ⅱ： 1h。 石蜡Ⅲ： 1h 1.7.6 组织包埋 将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡， 一起倒入容器内，然后立即投入冷水中， 使其立刻凝固成蜡块的过程。 包埋时， 将纸盒放在温箱旁边， 用镊子夹取组织平 放于纸盒底部，，再用温镊子轻轻拨动组织，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯， 沿壁倒入包埋用的纸盒中，速度要慢。待石蜡凝固（约 30min）后放入冰箱保鲜 层内以备后用。包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素，选择不同 熔点的石蜡，新的石蜡一般要熬顿几次，以免石蜡固定后有气泡，影响切片。用 于包埋的石蜡的熔点在 50~60℃之间。 1.7.7 组织切片 （1）从冰箱里拿出蜡块，进行修快 （2 ）将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 （3 ）将切片刀固定在刀夹上，刀口向上。 （4 ）摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。 （5 ）调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成 15 度左 右。 （6 ）调整厚度调节器到所需的切片厚度，先调约为 25um，待切平后改为 5um。 （7 ）一切调整好后方可以开始切片。 此时右手摇动转轮， 让蜡块切成蜡带， 左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以 40-60r/min 。 （8 ）切成的蜡带到 10-20cm 长时，右手用另一支毛笔轻轻地将蜡带挑起， 以免卷曲，并牵引成带，