人教版生物必修二 基因工程及其的应用.pptVIP

抗虫棉 毒蛋白 普通棉 苏精菌 设想能否培育像苏云金杆菌那样合成毒蛋白的抗虫棉? 已有育多倍体育种单倍体育种选择育种 种方法 诱变育种杂交育种 局限杂交育种一般只能在同种生物中进行  基因工程培育抗虫棉的大致步骤 概念 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种 基因提聊出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的 细胞里,定向地改造生物的遗传性状。又叫做基因拼接 技术或DNA重组技术。 三、原理:基因重组 四、操作水平:DNA分子水平  关键一:怎样从苏云金杆菌的DNA中提取出合成毒蛋白的 基因? 、基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶) 主要在微生物内一种酶,能将外来的DNA切断,限制外 来DNA的侵入,但对自身的DNA没有却无损害,并且这种切 割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性核酸内切酶  1、基因的“剪刀”——限制性核酸內切酶(简称限制酶) 特点:特异性(专一性) (1)一种只能识别一种特定的核苷酸序列【回文序列】 (2)只能在特定的位点上切割DNA分子 例如:大肠杆菌的一种限制酶(E.coR)能识别 GAATTC序列 111!l 实质:磷酸与脱氧核糖间的磷 酸二酯键断裂  P106:使用EcOR丨切割DNA分子 (识别 GAATTC) 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割, 产生的黏性末端相同,从而可以相互黏合。 GAA T C 11剩性端| CTTAA G 下列分别是由同一种限制酶切割形成的DNA片段的组合是 ①. CTGCA②.G ④ AATTC G CTTAA ACGTC  关键一、使用限制酶切断苏云金杆菌的DNA,提取出合成 毒蛋白的基因片段 CTTCATG AATTCCGTAG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGCATCTTAA GGGATT CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 目的基因 AATTCCGTAG GGCATCTTAA  关键二:怎样将提取到毒蛋白基因转入到普通棉细胞内? 2、基因的“运输工具”—运载体 原理:与目的基因结合后,利用运载体侵染受体细胞的 能力,将目的基因导入受体细胞,并在受体细胞中进行复 制和表达  2、基因的“运输工具”——运载体 ②常用的运载体主要有两类:质粒 噬菌体或某些动植物病毒  2、基因的最常用的运载体——一质粒 分布:存在于许多细菌以及酵母菌等生物中。 本质:细胞拟核或者细胞核外能够自主复制的很小的环状 DNA分子 特点: 0 DNA ①能在宿主细胞中稳定保存 并大量复制; ②通常含有多种标记基因, 大肠杆菌细胞 质粒 如抗生素抗性基因,便于筛 选质粒是否成功导入到了受 抗菌素抗性基因 体细胞内 ○ 质粒DNA 的基因  关键三、如何使提取到的毒蛋白基因片段与环状质粒结合 从而被送入受体细胞? AATTCCGTA 目的基因 GGCATCTTAA CTTCATG AATTCCGTAG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGCATCTTAAGGGAT质粒 用_同一种_限制酶切割运载体DNA分子和目的基 因,得到的黏性末端恰能碱基互补配对