花粉花药培养影响因素.pptVIP

自1964年印度学者Guha和 Maheshwar从 毛叶曼佗罗( Datura inoxia)花药培养中得到单 倍体植株以来,花药培养便成为生物学科 中研究的重要内容之一花药培养虽然具有 不少优点,但作为植物生物育种的手段还 有许多局限,其中有些植物花药培养的诱 导率、绿苗分化率低,即花药培养力低 主要原因。要解决花药培养力低的问题 目前应从研究影响花药培养的各种因素人 手来提高花药培养的效率。 1材料基因型 2预处理 3培养基 4培养条件 1材料基因型 材料的基因型是花药培养是否成功的关键 因素。不同基因型的材料,花药诱导率不 同。花药培养力的大小是受多基因控制的 数量性状.因而随基因型的差异变化很大。 基因型对花培的影响主要有以下几个方面, 生单倍体的途径状体或愈伤组织、发 生的频率、形成的时间、植株的再生能力 以及在所形成的植株中单倍体与二倍体的 频率等 王子霞等发现十个玉米材料的花药愈伤组织诱 率和分化率不同,有6个材料诱导出愈伤,诱导率 最高的为O.317%,最低为0.0167%,这6个材 料中只有2个分化出苗而其余4个材料愈伤诱导率 为0。在栽培稻 般以糯稻的培养力最高,其 培养力高低顺序为糯粳粳/籼籼型杂交稻籼 王立浩等报道在辣椒的花培中有些材料对某些培 养基根本无反应。烟草属各个种花药培养获得花 粉植株的比例最高,但郎氏烟草花药培养却很难 成功。由此可见,基因型的影响在花药培养中 遍存在 12小孢子发育时期(即花粉发育时 期 处于不同发育阶段的小孢子,其花药培养效率差 别很大。只有花粉发育到一定时期的花药,才对 外界刺激最敏感,而不同植物的花粉对外界刺激 的敏感时期是不同的。对多数植物来说,单核中 期至单核晚期的花粉都易形成花粉愈伤组织或花 粉胚。如水稻、烟草的花粉,从单核中期到双核 期皆可接受诱导,形成胚状体或愈伤组织;玉米 的花粉以单核中后期为佳;番茄花培的最适时 为单核期;辣椒花培胚状体形成的频率在单核后 期为最高(9.7%,双核次之(8.06%),单核中期 最低(3.8% 2预处理 在大多数花药培养成功的例子中,要想获 得理想的培养效果,常常在花药接种前进 行各种预处理。预处理的方法主要有低温 髙温以及甘露醇预处理等,其中以低温预 处理应用最为广泛。 2.1温度预处理 英金等”发现,对水稻亚种间杂种的花培,多数基因组合给以6℃-8℃4d的预 行预处理 伤组线 但超过60h反而抑制愈伤组织的形成。试验还对低温预处理和 肇细胞和线毡层在低温预处理过程 2.2甘露醇预处理 花药在离体条件下经过一定浓度的甘露醇预处理可以提 花药的培养率。李文泽等发现:甘露醇预处理比低温预处 理和对照能明显地提高大麦花粉存活频率;甘露醇预处理 3d能明显提高大麦花药培养愈伤组织诱导率、绿苗分化 率及绿苗产量。甘露醇不能作为碳源或能源被代谢利用 这一点大多数学者已达成一致,但对甘露醇预处理的作用 机理目前主要存在两种观点:一种认为甘露醇的作用是 予小孢子一个适当的渗透压,这对维持小孢子的活性是必 需的;另一种观点认为甘露醇预处理的主要作用是导致小 孢子短时间的 饿,从而使小孢子改变其发育方向 引起小孢子的去分化过程 3培养基 1培养基类型 花药培养应用的培养基类型主要是M 、 White、 Milr(即印 Blaydes))、B5、 Nitsch等,其中应用较广泛的是Ms 基本培养基。不同的植物种类对基木培养基的要求不 如在烟草花培中, Nitsch、H培养基效果较佳,而水稻 培常用Nflr培养基。N6培养基在水稻、玉米等作物上也 有良好的效果。在小麦上,通常应用的是MS基本培养基 些十字花科的植物(如甘蓝、油菜)则常使用MS和B5培养 基。人参的花药培养在MS、B5、、N6、 Miller、改良 White 和改良 Nitsch6种培养基中,除改良 Nitsch外,其余5种都有 较高的花粉愈伤组织诱导率