结核分枝杆菌实验室的检测的方法.pptVIP

结核分枝杆菌实 验室检测方法 分枝杆菌属 类细长略带弯曲,有时呈分枝状的杆菌,本属 细菌多具有抗酸性,又称抗酸杆菌(acid-fast bacillus),细菌体内含有分枝菌酸,细胞壁含有 大量脂类,这与分枝杆菌的染色性、抵抗力和致 病性等密切相关。 ·本属细菌已经被鉴定的有70多种,可分为三大类 结核分枝杆菌、非典型分枝杆菌、麻风分枝杆菌; 按生长速度可分为三类,即缓慢生长菌、迅速生 长菌和不能培养菌三种类型 结核分枝杆菌群 结核分枝杆菌,是人和动物结核病的病原体,包 括人结核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis)、牛分支杆菌( M bovis)、非洲 分支杆菌( M. africanum)和田鼠分枝杆菌 ( M. microti),前三种对人类治病,其中人型结 核分枝杆菌感染发病率最高 结核分枝杆菌属于缓慢生长分支杆菌 非典型分枝杆菌 偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟/脓肿、胞内分枝杆 菌、鸟分枝杆菌、戈登分枝杆菌、堪萨斯分枝杆 菌、偶然分枝杄菌、瘰疬分枝杄菌、浅黄分枝杆 菌、土分枝杆菌、草分枝杆菌、不产色分枝杆菌 海-溃疡分枝杄菌、金色分枝杆菌、苏尔加分枝杆 菌、蟾蜍分枝杆菌等 偶发分枝杆菌、龟分枝杆菌龟亚种、龟分枝杆菌 脓肿亚种属于迅速生长型,鸡蛋培养基上3-5天可 见菌落 麻风分枝杆菌 麻风分枝杆菌( Mleprae)是麻风病的病原 体,也是抗酸杆菌,但较结核分枝杆菌短 而粗,两端尖细,抗酸染色着色均匀,呈 束状或团状排列,结核分枝杆菌多散在, 偶有聚集。为典型的胞内寄生菌,有麻风 杆菌存在的细胞胞浆呈泡沫状,称麻风细 胞 ·体外不能培养。 结核分枝杆菌 全球约有1/3的人口已经感染结核分枝杆菌,有 2000万活动性肺结核患者,每年新发病例900万 人,每秒钟有1人感染结核,每年有300万人死 于结核病。 随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况的 改善,结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降 20世纪80年代后,由于艾滋病和结核分枝杆菌 耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、 贫困及人口流动等因素,全球范围内结核病的 疫情骤然恶化 生物学形状 结核分枝杆菌为细长略带弯曲的杆菌,有时可见 分枝状,无芽孢和鞭毛,因衰老或抗结核药物的 作用可出现多形态,如球状、串珠状或丝状, 大小为1~4X04μm。 细胞壁中含有大量脂质而不易着色,特别是有 大量分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面,一般 用抗酸染色。萋尼染色呈红色,背景为蓝色; 荧光染料金胺“o”染色,荧光显微镜下为橘黄色 培养特性 营养要求高,必须在含血清,卵黄,马铃薯, 培养基甘油及无机盐类的特殊培养基上生长,常用的 有 专 培养条度 件 菌 菌落特白 点 实验室检测方法 萋尼染色+荧光染色 病原学 罗氏培养+分枝杆菌快速培养 ·抗原抗体检测 免疫学 细胞因子检测 荧光定量PcR 分子生物学 芯片杂交 涂片镜检-抗酸染色 ·抗酸染色是目前为止最快的结核检出方法, 可用来检测病情进展,为感染控制提供参 考依据,可确证培养物为阳性 萋尼染色法一红色—普通显微镜(高倍) 荧光染色一黄或橘色一荧光显微镜(低倍) 联染法:敏感性髙,特异性好,速度快!