经典蛋白质溶液的浓缩方法.pptVIP

* 吸附法 定义：通过吸附剂直接去除溶液中的水分子以达到浓缩蛋白质溶液的目的。 吸附法是最简单快速的浓缩蛋白质溶液的方法，所需仪器简单，特别适用于稳定性较差的蛋白质。 吸附剂的选择： （1）吸附剂不能与溶液发生化学反应； （2）吸附剂对蛋白质不吸附； （3）吸附剂易于溶液分开。 常用的吸附剂：PEG、聚乙烯吡咯酮、蔗糖、凝胶等。 常用的吸附方法：透析袋法和凝胶浓缩法。 .......... * 2.1 透析袋吸附法 透析袋吸附法在透析技术的基础上改良而来的。 传统的透析是基于分子质量大小的液相分离技术，它由透过半透膜的选择性扩散来实现。但是纯粹的透析主要用于除去小分子类的溶质，而要达到浓缩（即除去溶剂）的目的则费时较长。 透析袋吸附法是将透析液换成可以吸水的溶液或者固体吸附剂，这样可实现很好的浓缩作用。 .......... * 2.1 透析袋吸附法 具体操作： 将蛋白质溶液加入到透析袋中（无透析袋可以用玻璃纸代替），结扎好后将PEG、蔗糖等吸附剂撒在透析袋外；或者把吸水剂配成30%-40%的溶液，将装有蛋白质溶液的透析袋放入吸附剂溶液中。吸水剂用过后，可放入温箱中烘干或自然干燥后重复利用。 优缺点： 优点：该方法简单高效，操作过程中可以保持蛋白质不变性，吸附剂可回收利用。 缺点：蛋白质可能吸附在透析膜上，导致回收率低。操作过程需要低温。 .........