高三生物二轮复习课件专题6“基因工程与克隆技术”课前诊断卷.pdfVIP

“基因工程与克隆技术”课前诊断卷 考点一 基因工程 1．在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗 性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答： (1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、_________________、将目 的基因导入受体细胞、________________________。 (2)A过程需要的酶有________和________。 (3)要把重组质粒导入土壤农杆菌，首先必须用________处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变 为________态，然后将________________________在缓冲液中混合培养完成转化过程。 (4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后，将离体棉花叶片组织培养成再生植 株要经过[C]________和[E]________。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C 过程的培养基中 加入________。 (5)目的基因能否在棉花植株体内维持和表达其遗传特性的关键是_________________。这需要 通过检测才能知道，检测采用的方法是____________________。 2．(2015·福建高考)GDNF 是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研 究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如下图1所示)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞 基因治疗的研究。请回答： 1 (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目 的 是 ____________________________________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的________ 限 制 酶进行酶切。 (3)经酶切后的载体和 GDNF 基因进行连接，连接产物经筛选 得 到 的载体主要有3种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、 GDNF 基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式，选择 Hpa Ⅰ 酶和BamH Ⅰ酶对筛选得到的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA 片 段 进行电泳分析，结果如上图2所示。图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 (4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF 基因是否成功表达，可用相应 的________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行________培养以得 到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 3．我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通 大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。下面为培育转基因水稻过程示意图，请回答： (1)在上述工程中，铁结合蛋白基因称为________，获取该基因后常用________技术进行扩增。 (2)构建重组Ti质粒时，通常要用同种限制酶分别切割______________________和________。 将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用________处理农杆菌，使重组Ti质粒易于导入。 (3)将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2 的筛选培养，可以 获得______________________；培养基3与培养基2的区别是______________________。 (4)检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水稻________________。 4．为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成 的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如