酶新项目工程复习资料.docVIP

酶活力指酶催化某一化学反应能力。大小可用在一定条件下所催化某一化学反应反应速率来表示 转换频率单位时间转化底物分子数 酶比活力指每mg酶蛋白（或每mg蛋白氨）所含酶活力单位数即：比活力=活力单位数/酶蛋白（氮）mg Ribozyme:生物体内某些含有酶类似性质亦含有催化功能RNA和DNA. 同工酶指催化相同化学反应，但其酶蛋白分子结构组成差别一种酶。 固定化酶是指经过物理或化学手段，将酶束缚于水不溶载体，或将酶在一定空间内呈闭锁状态存在，它能够连续地进行反应,反应后酶能够回收反复使用 酶不可逆抑制作用抑制剂和酶分子上某必需基团以牢靠共价键结合，使酶失活，不能用透析、过滤等物理方法除去抑制剂，而使酶失活。 酶法分析是一种以酶为分析工具分析法，对象能够是底物、辅酶、活化剂、酶抑制剂。关键用于测定和生物样品中酶以外其它物质含量。 克隆酶用DNA重组技术大量生产酶即称之为克隆酶 即酶分子化学修饰在分子水平上对酶用人工方法和某些化学基团，特别是含有生物兼容性物质进行共价链接，从而改变酶结构和性质。 别构酶是经过酶分子构象改变来改变活性，又称就变构酶，含有两个在空间上相互独立分开特异部位：活性部位、调节部位 生物催化：利用酶或有机体（细胞或细胞器等）作为催化剂实现化学转化过程 生物转化：是指外源化学物在机体内经多个酶催化代谢转化 酶分类1．氧化还原酶2．转移酶3．水解酶4．裂合酶5．异构酶6．连接酶，其中异构酶和裂合酶催化是单底物反应。 双倒数图中，横轴截距为-1/Km，纵轴截距为1/Vm 正协同别构酶特点是，呈S型曲线 酶生物合成四种模式1、同步合成型2、延续合成型3、中期合成型4、滞后合成型（核酸水平调节） 蛋白酶修饰方法有大分子结合修饰、侧链基团修饰、核苷酸链有限水解修饰、氨基酸置换修饰、肽链有限水解修饰和酶分子物理修饰。 酶提取法有：盐溶液提取法、酸溶液提取法、碱溶液提取法和有机溶剂提取法。 专一性不可逆抑制作用分Ks型和Kcat型。 和酶专一性相关是结合部位，和催化能力相关是催化部位。 提升酶产量1.经过条件控制提升酶产量（1）添加诱导物（2）降低阻遏物浓度2.经过基因突变提升酶产量3.其它（添加表面活性剂） 酶蛋白链大分子修饰剂有糖类、聚乙二醇、合成大分子多聚物、天然大分子 感受器是固定化酶，基础电极做换能器 酶在医药方面应用 一、酶在疾病治疗方面应用 1、消化酶类（蛋白酶、淀粉酶等）2、抗炎及清疮用酶（溶菌酶、超氧化物歧化酶SOD等）3、溶纤酶类：（尿激酶，纳豆激酶）4、心血管疾病用酶（激肽释放酶、弹性酶、细胞色素C、辅酶Q10、辅酶A等）5、遗传性缺酶症治疗用酶：α-半乳糖苷酶、酪氨酸酶、苯丙氨酸氨基裂解酶（固定化酶）6、肿瘤治疗用酶（L-天门冬酰胺酶，谷氨酰胺酶） 二、酶在疾病诊断方面应用 1、据体内原有酶活力改变来诊断某些疾病；酶活力测定 转氨酶：测量血清中谷丙转氨酶（GDT）和谷草转氨酶（GOT）活力测定，已在肝脏疾病和心肌梗塞等疾病诊断中得到广泛应用 2、利用酶来测定体内某些物质含量从而诊断某些疾病。酶法分析 比如：利用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶检测葡萄糖含量，诊断糖尿病 三、酶在药物制造方面应用 酶在药物制造方面应用是利用酶催化作用将前体物质转变为药物，现不少药物包含某些珍贵药全部是由酶法生产。比如，利用青霉素酰化酶制造半合成抗生素，β－酪氨酸酶制造多巴 酶在食品生产方面应用 1．酶在烘烤中应用 比如：淀粉酶、氧化还原酶、脂肪酶、蛋白酶、谷氨酰胺转移酶 2．乳品工业 比如：（1）凝乳酶——制造干酪（2）H2O2酶——牛奶消毒（3）溶菌酶——添加在婴儿奶粉（4）乳糖酶——分解乳糖（5）脂肪酶——黄油增香 3．酶用于蛋品加工 比如：葡萄糖氧化酶去除禽蛋中微量G 4．肉、鱼制品加工 比如：用蛋白酶，改善组织，嫩化肉类 5．用于果蔬加工和保鲜 比如：葡萄糖氧化酶可除去果汁、饮料、罐头食品中O2预防贮止过程中发生褐变 固定化酶优缺点 优点：数次使用能够装塔连续反应纯化简单提升产物质量应用范围广 缺点：首次投入成本高大分子底物较困难酶活力有损失 酶固定化方法 1吸附法 优点就是操作简单，可供选择载体类型多，吸附过程可同时到达纯化和固化目标，所得到固定化酶使用失活后能够重新活化和再生。 缺点是最适酶量选择单凭经验，而且pH、温度和离子强度选择对每一种酶和每一种载体全部是各别决定。酶和载体间结协力不强，会造成催化活力丧失和沾污反应产物。 2包埋法 优点就在于它是一种反应条件温和、极少改变酶结构固定化方法。 缺点是只有小分子底物和产物能够经过高聚物网架扩散，对那些底物和产物是大分子酶并不适合。这是因为高聚物网架会对大分子物质产生扩散阻力造成固定化酶动力学行为改变，使活力降低。 3结正当 优点:在于所得到固定化酶，酶不会脱落，能够连续