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植物细胞全能性 徐晓洋 2011201043 植物细胞全能性( totipotency):指植物的每个 细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具 备发育成完整植株的遗传能力。在适宜条件下, 任何一个细胞都可以发育成一个新个体。植物 细胞仝能性是植物组织培养的理论基础。 Root of carrot p Root cls Plantlet E nutrient medium Cell division in culture 1、植物细胞全能性的早期研究 2、植物细胞全能性理论的实验证据 3、植物细胞全能性的调控机制 4、植物细胞全能性(组织培养)的应用 5、展望 1、植物细胞全能性的早期研究 德国植物生理学家科戈特利布哈布兰特( Gotlieb Haberlandt,1854-1945)在1902年提出植物细胞全能性的 理论,即植物体细胞在适当的条件下,具有不断分裂和 繁殖、发育成完整植株的能力。 History of plant tissue culture Molecular Biotechnology Volume 37, Number 2, 101007/0031-3 Gotlieb Haberlandt Plant Tissue Culture 100 years since gottlieb haberlandt 戈特利布·哈布兰特将分离的小野芝麻栅栏细胞、大花 凤眼兰叶柄木质部髓细胞、疗肺草和荨麻腺毛细胞、紫鸭 拓草雄蕊绒毛细胞等,培养在克诺普盐溶液添加葡萄糖和 蛋白胨的培养基中,以诱导培养细胞的分裂和分化。虽然 这些培养细胞能合成淀粉,体积增大,存活几个星期,但 没有细胞分裂发生。主要原因是他所选择的实验材料和培 养基不适合。在以后的研究中,培养基成分的研究成为组织 培养研究或植物细胞全能性研究的一个突破口。 20世纪30年代至50年代期间,随着B族维生素的应用、 生长素和细胞分裂素的发现,为完善培养基成分和进行植 物组织培养奠定了基础。 1957年斯科格和米勒( Skoog and miller)提出植物激 素控制器官形成的概念,指出在烟草髓组织培养中根和 芽的分化取决于生长素与细胞分裂素的相对浓度,比例 高时促进生根,比例低则促进芽的分化 1962年,穆拉希格和斯科格( Murashige and Skoog)提 出了适合于烟草组织培养的Ms培养基,并成为现今应用 最广的一种培养基。这些研究为用实验证实植物细胞的 全能性打下了坚实的基础。 2、植物细胞全能性理论的实验证据 要证实植物细胞的全能性,需要解决两个问题 是离体单细胞增殖,二是从单细胞增殖的组织发育成完 整植株。 第一个问题在发展细胞培养装置后得到解决,先后 发展了四种培养方式:震荡培养,平板培养,悬浮培养 和悬滴培养 在细胞培养的基础上赖纳特和斯图尔德( Reinert和 Steward,1958报道了胡萝卜悬浮培养细胞和愈伤组织形 成体细胞胚,首次用实验科学地论证了植物细胞全能性。 carrot plant col division in culture 胡萝卜( Reinert and steward,1958 花药培养( Guha and Maheswari1966 烟草液形几发育成幼长植将均 成防植株 烟草(vasi1965) 原生质体培养( Nagata and Takebe,1971) 3、植物细胞全能性的调控机制 植物细胞全能性的证实推动了植物组织培养及其相关 研究领域的迅猛发展。在茎尖和愈伤组织培养硏究中,我 国已有π00种以上的植物能离体再生植株。尽管如此,植 物细胞全能性的调控机制仍然不清楚,吸引人们从细胞学、 分子生物学等方面进行研究。 31细胞学研究 植物体细胞全能性的表达,需要诱导分化成熟的细胞 脱分化成为分生组织细胞,再诱导分生组织或愈伤组织分 化不定芽或体细胞胚胎,最后形成完整植株 在研究胡萝卜培养细胞的体细胞胚发生过程中,发现 有感受态细胞的存在。感受态细胞指外植体细胞在培养初 期获得能被诱导形态发生的状态的细胞。 胡萝卜感受态细胞可以分成以下几类:B状态细胞,球 形且液泡化、直径约为12μm的细胞;C状态细胞,球形且 细胞质丰富、直径约为12um的细胞;D状态细胞,长形、 液泡化的细胞。 B状态细胞的细胞壁存在阿拉伯半乳聚糖蛋白(AGP), 而C状态细胞不含AGP。麦克凯布( McCabe,1997)等,利 用能够识别上糖类抗原簇的单克隆抗体JM8,进行细胞免疫 荧光标记,揭示了胡萝卜感受态细胞发生和生长发育的过程。