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. 《中国药典》2015 版第二部第 1235-1236 页 维生素 B12 Weishengsu B12 Vitamin B12 C63H88CoN14O14P 1355.38 本品为 Coα-[ α-(5,6-二甲基苯并咪唑基） ]-Co β氰钴酰胺。按干燥品计算， 含 C63H88CoN14O14P不得少于 96.0%。 【性状 】 本品为深红色结晶或结晶性粉末；无臭；引湿性强 本品在水或乙醇中略深，在丙酮、三氯甲烷或乙醚中不溶。 【鉴别 】 （1）取本品约 1mg，加硫酸氢钾约 50mg，置坩埚中，灼烧至熔 融，放冷，加水 3ml，煮沸使溶解，加酚酞指示液 1 滴，滴加氢氧化钠试液至显 淡红色后，加醋酸钠 0.5g、稀醋酸 0.5ml 与 0,2%1-亚硝基 -2-萘酚 -3,6-二磺酸钠溶 液 0.5ml，即显红色或橙红色；加盐酸 0.5ml，煮沸 1 分钟，颜色不消失。 （2 ）取含量测定项下的供试品溶液，照紫外 -可见分光光度法（通则 0404 ） 测定，在 278nm、361nm 与 550nm 的波长处有最大吸收。 361nm 波长处的吸光 度与 278nm 波长处的吸光度的比值应为 1.70~1.88。361nm 波长处的吸光度与 550nm 波长处的吸光度的比值应为 3.15~3.45。 （3 ）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 449 图）一致。 【检查 】 溶液的澄清度 取本品 20mg，加水 10ml 溶解后，溶液应澄清 有关物质 避光操作，溶液临用新制。取本品，加流动相溶液并稀释成每 1ml 中约含 1mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取 1ml，置 100ml 量瓶中，用 流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另取本品约 25mg，置 25ml 量瓶中， 加水 10ml 使溶解，加 0.1%氯胺 T 溶液 5ml 与 0.05mol/L 盐酸溶液 0.5ml，用水稀 释至刻度，摇匀，放置 5 分钟，精密量取 1ml，置 10ml 量瓶中，用流动相稀释 至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液；再精密量取对照溶液 1ml，置 10ml 量瓶 中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液。照高效液相色谱发（通则 0512）试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇 -0.028mol/L 磷酸氢二 钠溶液（用磷酸调节 pH 值至 3.5 ）（26:74 ）为流动相，检测波长为 361nm 。系统 适用性溶液中应出现维生素 B12 峰与一个降解产物峰（相对保留时间约为 1.4）， 二者的分离度应大于 2.5，灵敏度溶液中主峰的信噪比应大于 3, 。精密量取供试 品溶液与对照溶液各 10 μl ，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留 时间的 3 倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰， 各杂质峰面积的和不得大于对 照溶液主峰面积的 2 倍（ 2.0%）。 假维生素 B12 取本品 1.0mg，置分液漏斗中，加水 20ml 使溶解，加甲酚 - 四氯化