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第二章 紫外-可见分光光度分析法; 颜色的产生白光(太阳光):由各种单色光组成的复合光
; 有色物质的不同颜色是由于吸收了不同波长的光所致。溶液能选择性地吸收某些波长的光,而让其他波长的光透过,这时溶液呈现出透过光的颜色。透过光的颜色是溶液吸收光的互补色。有色溶液对各种波长的光的吸收情况,常用光吸收曲线来描述。将不同波长的单色光依次通过一定的有色溶液,分别测出对各种波长的光的吸收程度(用字母A表示)。以波长为横坐标,吸光程度为纵坐标作图,??得的曲线称为吸收曲线或吸收光谱曲线。;能复合成白光的两种颜色的光叫互补色光。物质所显示的颜色是吸收光的互补色。;;电磁波和能量;分光光度分析法是以物质对光的选择性吸收为基础的分析方法。; 几乎所有的无机离子和许多有机化合物可以用分光光度法进行测定。如土壤中的氮、磷以及植物灰、动物体液中各种微量元素的测定。
;;(1)能源提供能量;
(2)能量与被测物之间的相互作用;
(3)产生信号。
基本特点:
(1)一般光分析法均包含三个基本过程;
(2)选择性测量,不涉及混合物分离(不同于色谱分析);
(3)涉及大量光学元器件。; 溶液颜色与光吸收的关系;;吸收曲线的讨论;KMnO4的颜色及吸收光谱;叶绿素的结构和吸收光谱;3.紫外—可见分子吸收光谱与电子跃迁;能级跃迁;讨论;三、分子吸收光谱与能级跃迁;?⑴ σ→σ*跃迁;? ⑶ π→π*跃迁;生色团与助色团;红移和蓝移;四、光的吸收定律; 透过光的强度It;与入射光的强度Io比之比称为透光度或透光率,用T表示。 T= It/Io;将上式变成常用对数,得;朗伯定律:A=K2*b;比尔定律:A=K3*C; 朗伯-比尔定律的表达式
A=lg(I0/It)= εb c
式中A:吸光度;描述溶液对光的吸收程度;
b:液层厚度(光程长度),通常以cm为单位;
c:溶液的摩尔浓度,单位mol·L-1;
ε:摩尔吸光系数,单位L·mol-1·cm-1;
或: A=lg(I0/It)= a b c
c:溶液的浓度,单位g·L-1
a:吸光系数,单位L·g-1·cm-1
a与ε的关系为:
a =ε/M (M为摩尔质量) ;透光度;2.摩尔吸光系数ε的讨论;摩尔吸光系数的讨论;3.偏离朗伯—比耳定律的原因;(1)物理性因素;非单色光作为入射光引起的偏离; A总 = lg(Io总/It总 )
=lg(Io1+Io2)/(It1+It2)
= lg(Io1+Io2)/(Io110-ε1bc +Io210-ε2bc )
令: ε1-ε2 = ?? ;
设: Io1 =Io2
A总 = lg(2Io1)/It1(1+10 - ?εbc )
= A 1 + lg2 - lg(1+10 - ?εbc )
讨论:;讨论:;讨论: A总 =A1 + lg2 - lg(1+10-?εbc ) ;(2) 化学性因素;第二节 紫外可见分光光度计;仪器;一、基本组成 general process; 2.单色器;3.样品室;二、分光光度计的类型;3.双波长
将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△?= 1~2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。;;A 原理;光栅和棱镜分光原理;双光束光度计动画示意;双波长光度计光路示意图;紫外-可见分光光度法中条件的选择;一、显色反应的选择;3.氧化还原显色反应;4.显色剂;二、显色反应条件的选择;三、共存离子的消除;四、测定条件的选择; 2.选择合适的参比溶液;参比溶液的选择一般遵循以下原则:;3.控制适宜的吸光度(读数范围);最佳读数范围与最佳值;提高光度测定选择性和灵敏性的捷径
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