好氧反硝化菌Pseudomonas aeruginosa strain G12同时处理水体中硝酸盐氮和Cr（Ⅵ）的研究.pdfVIP

中文摘要 摘 要 随着城市化进程加快以及工业、农业的快速发展，人类在生产和生活活动中排 出的含各种类型污染物的废水，如有机类污染、无机物类污染以及重金属类污染 等，这些含污染物的废水排入水体极易形成复合污染。复合污染不仅破坏水体生 态环境，还对人体健康带来巨大的危害。水体中硝酸盐氮形成的无机类污染和 Cr(Ⅵ)形成重金属类污染是较为常见的复合污染之一，在现有污水处理过程中，分 别针对硝酸盐氮和 Cr(Ⅵ)污染的处理方法研究较多，传统的去除硝酸盐氮的方法有 膜分离法、离子交换法、氧化还原法、催化还原法以及微生物法等，主要常见的 去除 Cr （VI ）方法主要有吸附法、溶剂萃取分离法以及化学沉淀法等，但上述方 法仅针对于某一类污染物引起的污染。如何利用有效的措施经济节能、安全环保 的去除水体中硝酸盐氮和Cr(Ⅵ)带来的复合污染受到人们的极大关注。 微生物法在处理环境污染问题具有巨大的潜力，本文重点探求一种能在好氧反 硝化同时还原 Cr(Ⅵ) 的细菌，用于处理硝酸盐氮和Cr(Ⅵ)对环境造成的复合污染问 题。本研究的目的是研究菌株同时还原 Cr(Ⅵ)和硝酸盐的能力及其反应代谢机理， 使分离筛选出的细菌在实际污水处理中发挥作用，为提高污水的硝酸盐和铬处理 效率提供理论依据。本文涉及的好氧反硝化菌株分离自重庆市某污水处理厂氧化 沟工艺二沉池的活性污泥，在实验室驯化培养后开展了如下研究：对菌株 G12 进 行 16S rRNA 基因鉴定；研究初始 Cr(Ⅵ)浓度对好氧反硝化菌脱氮效率的影响以及 硝酸盐浓度对 Cr(Ⅵ)还原的影响；研究各种影响因素，如碳源、氮源、接种量以及 共存二元重金属离子等对菌株在硝酸盐和 Cr(Ⅵ)还原过程的影响；利用 FTIR 、XRD 以及 XPS 等仪器分析研究 Cr(Ⅵ)及其还原产物，从而研究 Cr(Ⅵ)还原与好氧反硝 化同时代谢机理。 研究结果表明：（1）在反硝化固体培养基上，菌落表面边缘整齐，表面呈光 滑、湿润、不透明、浅黄胶状。利用 16S rRNA 基因测序，确定该菌株 G12 属于 Pseudomonas aeruginosa strain （铜绿假单胞菌属），并命名为 Pseudomonas aeruginosa strain G12 。将菌株G12 以 1% （v/v ）的比例接种到含500 mg/L 的硝酸 盐氮、10 mg/L 的Cr(Ⅵ) 的好氧反硝化培养基中，再以 30℃、120 rpm 的条件连续 培养 96 h 。菌株 G12 在 48 h 进入生长稳定期，其 OD600 值达到最大为 1.7 左右。 硝酸盐氮在 72 h 左右去除率达到 98 % ，基本被完全去除，于 96 h 硝酸盐浓度降 低到了 10 mg/L；在96 h 时，Cr(Ⅵ) 的还原率达到 93.32 % ，上清液中Cr(Ⅵ) 的浓 度约为 0.668 mg/L 。（2 ）在初始硝酸盐浓度为 100、300、500、700 mg/L 时，培 养 72 h 以后，硝酸盐基本全部被还原，还原率分别为95.8 %、99.5 %、97.2 %、 I 重庆大学硕士学位论文 70.3 % ；当硝酸盐浓度初始浓度为 500 mg/L 时，菌株 G12 对 1、5、10、15、20 mg/L 的Cr(Ⅵ)还原转化率分别为 86.6 %、94.9 %、98.4 %、99.1 %、99.2 % ，相应的对 硝酸盐氮的还原率分别为 96 %、96.5 %、97.2 %、96.7 %、97.4 % ；Cr(Ⅵ) 的还原 效果与培养基中的硝酸盐浓度成正相关；Cr(Ⅵ) 的还原和硝酸盐还原是同时进行 的，集中在菌株 G12 的对数增长期。（3 ）不同的环境影响因子对菌株 G12 的代 谢影响实验结果表明：①在不同碳源条件下，菌株 G12 的生长量以及对硝酸盐氮 和 Cr(Ⅵ) 的去除效果不同，不同碳源对菌株 G12 代谢影响的排序分别为：琥珀酸 钠﹥柠檬酸钠﹥葡萄糖﹥乙酸钠，柠檬酸三钠较琥珀酸钠而言更廉价易得，在不 影响实验效果的情况下，选用柠檬酸钠作为碳源；②在分别以氨氮、硝酸盐氮和 亚硝酸盐氮为唯一氮源的情况下，不同氮源对菌株 G12 代谢影响的排序分别为： 硝酸盐氮﹥氨氮﹥亚硝酸盐氮，故选用硝酸盐作为氮源进行后续研究；③接种量