遗传实验-PTC味盲基因频率的分析.docxVIP

遗传学实验报告 PTC 味盲基因频率的分析 刘乐乐生计 11.3 2013年 12月 2 日 一、实验目的： 1、 通过对PTC味盲基因频率的分析，了解群体基因频率测算的一般方法； 2、 理解遗传平衡定律，了解改变群体平衡的因素。 二、实验原理 PTC即苯硫脲，是一种无毒无副作用的化合物，人体对苯硫脲 （PTC尝味的能力是由 一对等位基因（T）所决定的遗传性状，其中 T对t为不完全显性。在不同人群中对该物质 的尝味能力不同。利用这一原理，将 PTC配制成各种浓度的溶液，由低浓度到高浓度逐 步测试尝味能力，由此可区分出味盲（隐性纯合体）、高度敏感（显性纯合体）和介于 二者之间的人（杂合体）。据此可对人群中味盲基因的频率进行分析。 正常尝味者的基因型为 TT,能尝出1/750,000??1/6,000,000的PTC溶液的苦味；具 有基因Tt的人尝味能力较低，只能尝出 1/48,000??1/380,000的PTC溶液的苦味；基因 型为tt的人只能尝出＞1/24,000的PTC溶液的苦味，甚至对 PTC的结晶物也尝不出苦味 来，在遗传学上被称为味盲。 哈迪一温伯格定律也称遗传平衡定律，是由英国数学家哈迪（ G.H.Hardy）和德国医 生温伯格分别于 1908年和 1909年各自提出的。 两个等位基因的哈迪一温伯格定律的公 式为：（p+q）2=p2+2pq+q2=1。其中p代表一个等位基因（如 A）的频率，q代表另一个 等位基因（如a）的频率，p2代表一个等位基因纯合子（如 AA）的频率，q2代表另一个 等位基因纯合子（如aa）的频率，2pq代表杂合子（如Aa）的频率。 三、实验材料 PTC溶液的配制 1、 原液：取PTC结晶l.3g，加蒸馏水1000ml，在室温（20C左右）下 1-2日即完全溶解。 2、 原液的PTC浓度约为1/750，原液稀释1倍为2号液，2号液稀释1倍为3号液，以 此类推，直至配成 14 号液，浓度为 1/6,144,000。 3、将配好的14种PTC溶液分别置于消毒好的滴瓶中（见表一） ifi号 配制方送 浓 ^mol/L 基因型 1号 1 3gPT€+S?? 水 lOOWI 1/750 tt 2号 （号液lOOif蒸憎水100ml 1/1500 it 3号 2昌液lOOnZ蒸搐水100ml 1/3000 tt ?号 普号液 tOOnl + ^ta 水 100ml 1/6000 tt 5号 4 号液 IDOnZ 蒸（8 水 100ml 1/12000 tt 吕号液 lOOnl+STM 水 100ml 1/24000 tt 丁号 庁号液100h“蒸帼水lOOni* 1/48000 Tt 8号 7 号液 水 1051 1/96000 Tt 9号 8 号液 100nl+^K| 水 100ml 1/192000 Tt 10号 9 号液 100wil+5EtS 水 lOOnd 1/384000 Tt 11号 10号液100M+蒸慣水WOnl 1/768000 n 12号 讨号港10011+蒸谓水IDOml 1/1536000 TT 13号 1?号液 10011* 蒸 iff 水 100ml 1/3072000 TT 1住 13号港10加1*藍储水WOrJ 1/6144000 TT 表1各组PTC的浓度及对应的基因型 四、实验步骤 1、 用滴管滴4?5滴溶液于受试者舌根部，让受试者品味，然后用蒸馏水作同样的试验。 初始浓度不能太高。 2、 询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道，若不能鉴别或鉴别不准确，则依次用更高 浓度溶液重复试验，直至能明确鉴别出 PTC的苦味为止。 3、 当受试者鉴别出某一号溶液时， 应当再用此号溶液重复尝味三次， 三次结果相同时, 才是可靠的。 4、 测定时应将PTC溶液与蒸馏水反复交替给受试者，且不能让受试者知道溶液浓度， 排除心理暗示作用以免影响结果的准确性。 五、结果分析 对全班同学的同学基因型进行分析，根据哈代温伯格定律计算出 T及t的基因频率， 假设班级群体是一个遗传平衡群体，计算出平衡群体中的 tt、Tt、TT的理论基因频率, 并进行x 2检验。数据结果见表 2。 TT Tt tt 总计 实际频数(0) 15 18 2 35 基因频率 pT= 68.6% qt=31.4% 理论频数(C) Np2=16.5 N2pq=15 2 Np2=3.5 N=35 (O-Cf/C 0.073 0.600 0.643 1.316 表2PTC味盲基因频率的实验数据汇总及结果分析 查表可以知道，在自由度为 2的情况下，x 0.05=5.99,而我们班中x =1.316。故x x 0.05，说明实际频数和理论频数之间有关联性，即在 a =0.05的水准下，我班 T、t基 因的分布符合遗传平衡体系。实际上