食品中防腐剂 苯甲酸含量的测定.pptVIP

2. 进样系统 ? 进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，要求密封性 好，死体积小，重复性好，进样引起色谱分离系统的压力 和流量波动要很小。 常用的进样器有以下二种：六通阀进样器和自动进样器 3. 分离系统 分离系统的主要部件是色谱柱。 一般要求： 柱效高、选择性好、分析速度快是 对色谱柱的。色谱柱管为内部抛光的不锈钢 柱管或塑料柱管， 色谱柱的种类 ? HPLC 微粒填料：硅胶，以及以硅胶为基质的键合相、氧 化铝、有机聚合物微球 ? 填料粒度： 3μm 、 5μm 、 7μm 、 10μm 等 ? 柱效的理论值： 5000~16000 块理论塔板数 ? 柱长： 100~300mm ? 柱内径： 4.6 mm 或 3.9 mm 常用 保护柱： 一般在色谱柱前要求安装保护柱，即在 分析柱的入口端、装有与分析柱相同固定相 的短柱（ 5 ～ 30mm 长），可以经常而且方便 地更换，因此，起到保护延长分析柱寿命的 作用 任务 1 食品中防腐剂 ------- 苯甲酸含量的测定 思考 1. 如何测定食品中防腐剂苯甲酸的含量？ 2. 所测定产品的质量合格么？ 能力目标 ? 能利用液相色谱法测定食品中防腐剂苯甲 酸的含量； ? 能熟练操作及使用液相色谱仪器； ? 能对仪器进行保养和简单的维护； ? 能分析所测的色谱图数据并给出结果 知识目标 ? 液相色谱法的基本原理 ? 液相色谱仪基本构造及使用方法； ? 液相色谱法的定性分析及定量分析方法 学习情境 1. 试验原理 ： 将试样加温除去二氧化碳和乙醇，调 pH 至近中性，过滤后进入高效液相色谱仪，经反相色谱分离 后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。 ? 甲醇：经滤膜过滤（ 0.5 微米） ? 稀氨水（ 1+1 ）：两者等体积混合 ? 乙酸铵溶液（ 0.02mol/L ）：称取 1.54g 的乙酸铵，加水至 1000ml. 溶 解，经 0.45 微米滤膜过滤。 ? 碳酸氢钠溶液（ 20g/L ） : 称取 2g 碳酸氢钠（优级纯），加水至 100ml 摇匀 ? 注：方法中所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水， 溶液为水溶液。 2. 试剂 ? 苯甲酸标准储备液：准确称取 0.1000g 苯甲酸，钾碳酸氢 钠溶液（ 20g/L ） 5ml, 加热溶解，移入 100ml 容量瓶中，加 水定容，苯甲酸含量为 1mg/mL ? 苯甲酸标准使用溶液：取储备液 10.0ml, 放入 100ml 容量瓶 加水稀释至刻度，摇匀。经 0.45 微米滤膜过滤。 ? 高效液相色谱仪；紫外检测器 (FID) ； ? 色谱柱 ;YWG-C 18 4.6 ㎜× 250mm ； 10μm 不锈钢柱 ? 流动相：甲醇：乙酸铵溶液（ 0.02mol/L ） (5:95) ? 流速： 1ml/min ? 进样量： 10μL ? 检测器：紫外检测器， 230nm,0.2AUFS 注：根据保留时间定性，外标峰面积法定量。 3. 仪器及条件 ? 汽水：称取 5.00g~10.0g 试样，放入小烧杯，微温搅拌除去二氧化碳，用氨 水（ 1+1 ）调 pH 约 7. 加水定容至 10~20ml, 经滤膜过滤（ 0.45μm ） ? 果汁类：称取 5.00 ～ 10.0g 试样，用氨水（ 1+1 ）调 pH 约 7. 加水定容至适当 体积，离心沉淀，上清液经滤膜过滤（ 0.45μm ）。 ? 配制酒类：称取 10.0g 试样，放入小烧杯，水浴加热除去乙醇，用氨水 （ 1+1 ）调 pH 约 7. 加水定容至适当体积，经滤膜过滤（ 0.45μm ）。 4 ．试验程序： 试样中苯甲酸含量（ g/Kg ） , 按下式计算 5. 结果的表示和计算： 1000 1000 1 2 ? ? ? ? V V m A X 式中 X ------ 试样中苯甲酸的含量（ g/Kg ） A------- 进样体积中苯甲酸的质量（ g ） V2 ------- 进样体积，（ ml ） V1 ------- 试样稀释总体积，（ ml ） m------- 试样质量，（ g ） 重复条件下获得的两次独立测定结果的 绝对差值不得超过算术平均值的 10% 6. 精密度 7 ．实验结果分析：判断产品质量是否合格？ 相关理论知识 一、高效液相色谱分析法（ HPLC ）概述 高效液相色谱还可称为高压液相色谱、高速液相色谱、高 分离度液相色谱或现代液相色谱，与经典液相（柱）色谱法比 较， HPLC 能在短的分析时间内获得高柱效和高分离能力。 高效液相色谱分析法与气相色谱分析法一样，具有选择性 高、分离效率高、灵敏度高、分析速度快的特点，但它恰好能 适于分析气相色谱分析法不能分析的高沸点有机化合物、高分 子和热稳定性差的化合物以及具有生物活性的