免疫标记和标记免疫免疫标记技术.pptVIP

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免疲标讥敬术 第一节免疫标记技术的基本概念 免疫标记与标记免疫的概念 二、常用的免疫标记物质 免疫标记与标记免疫 免疫标记技术 标记物与免疫活性物质的联接技术 标记免疫技术: 以标记免疫物质检测相应靶物质的技术 常用的免疫标记物质 类别 标记物 用途 荧光素FITC、RB200、 TRITO免疫组化 镧系元素螯合物 免疫分析测定 放射性核素H、1C、32P、57Gr 免疫分析测定 酶 HRP、AP 免疫组化 免疫分析测定 化学发光物 Luminol、 lucigenin 免疫分析测定 金属颗粒胶体金、铁蛋白 免疫组化 免疫分析测定 第二节酶标记技术 常用标记方法 标记免疫物的分离与鉴定 常用标记方法 1、常用酶 辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶(AP) 2、标记方法 戊二醛交联法 过碘酸盐氧化法 戊二醛交联法(一步法) 抗体NH2+COH(CH2)3COH+NH2酶 抗体NH2=CH-(CH2)3CH=NH2-酶 抗体NH2=CH(CH2)xCH=NH2-抗体 酶NH2=CH-(CH2)3CH=NH2酶 戊二醛交联法(二步法) COH-(CH2)3COH+NH2酶 抗体NH2+CHO-(CH2)3CH=NH2酶 抗体NH2=CH(CH2)3CH=NH2-酶 过碘酸盐氧化法 NaIO4 酶-五炭糖环 +NH2抗体 Nabh HO OH 抗体 抗体 抗体 Schiff碱 标记免疫物的分高与鉴定 1、分离 目的:去除游离酶 方法:盐析、柱层析 鉴定 抗体活性 酶活性 标记物纯度

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