中药制剂分析 其他分析方法 芳胺类及芳烃胺类药物分析—邹春阳.pptVIP

（二）溴量法 《中国药典》2015版收载的重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液均采用溴量法测定含量。其测定原理系药物分子中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基的邻位、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据与药物定量反应消耗的溴滴定液的量，即可计算供试品的含量。以盐酸去氧肾上腺素的溴量法为例： 1．基本原理 以反应式表示： 2．测定方法 取本品约0.1g，精密称定，置碘量瓶中，加水20ml使溶解，精密加溴滴定液(0.05mol/L)50ml，再加盐酸5ml，立即密塞，放置15min并振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸钠(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液(0.05mol/L)相当于3.395mg的盐酸去氧肾上腺素(C9H13NO2·HCl，分子量为203.67)。按干燥品计算，含C9H13NO2·HCl应为98.5%~102.2%。 3．含量计算 计算公式为剩余滴定，式中符号意义同肾上腺素原料药含量测定公式符号。 （三）亚硝酸钠法 盐酸克伦特罗结构中有芳伯氨基，《中国药典》2015版采用亚硝酸钠法测定其含量。 测定方法 取本品约0.25g，精密称定，置100ml烧杯中，加盐酸溶液(1→2)25ml使溶解，再加水25ml，照永停滴定法(通则0701)，用亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液(0.05mol/L)相当于15.68mg的盐酸克伦特罗(C12H18Cl2N2O·HCl，分子量为313.65)。 （四）比色法 利用药物结构中有酚羟基与亚铁离子配位显色，采用比色法进行药物含量测定是常用方法。也可利用结构中的芳伯氨基进行重氮化-偶合反应显色。 以盐酸克伦特罗栓的含量测定为例。测定时先加三氯甲烷使栓剂基质溶解后，用盐酸(9→100)提取盐酸克伦特罗，加亚硝酸钠试液后，芳伯氨基重氮化，随即在酸性溶液中偶合，常用的酸性偶合剂为N-(1-萘基)-乙二胺。 操作注意事项 因偶合剂遇亚硝酸也能变色，所以经重氮化后，需加入氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去。 （五）高效液相色谱法 《中国药典》2015版收载的盐酸肾上腺素注射液、盐酸异丙肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁醇胺片及吸入气雾剂、胶囊、注射剂、缓释片等均采用高效液相色谱法测定含量。高效液相色谱法分离效能高，可以使药物合成的中间体、降解产物等有关物质分离，从而避免其干扰。以盐酸肾上腺素注射液的含量测定为例。 1．色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.14%庚烷磺酸钠溶液-甲醇(65:35)为流动相；检测波长为280nm。理论板数按肾上腺素峰计算不低于3000。 2．测定方法 精密量取本品适量，用流动相定量稀释制成每1ml中含肾上腺素0.2mg的溶液，作为供试品溶液；另取肾上腺素对照品适量，精密称定，加流动相适量，加冰醋酸2～3滴，振摇使肾上腺素溶解，用流动相定量稀释制成每1ml中含肾上腺素0.2mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。除检测波长为280nm外，照肾上腺素有关物质项下的色谱条件，精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。 【拓展阅读】肉类食品中瘦肉精的检测 任何能够促进瘦肉生长、抑制动物脂肪生长的物质都可以叫做“瘦肉精”，瘦肉精是一类非常廉价的动物用药的统称。在中国，通常所说的“瘦肉精”是指盐酸克伦特罗，是肾上腺素类神经兴奋剂，属于β-兴奋剂类激素，生物利用度很高，它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。 研究指出，在相同浓度的饲料添加剂中，CLB在猪体内残第留量的大小顺序为：肝脏肾脏肌肉血浆，并且随着添加量的增加，组织中的残留量也随即增加。 国家或地区 药品名称 样品名称 最高残留限量/μg?kg-1 欧盟 盐酸克仑特罗 精肉(牛、马科动物) 0.1 ? 肝脏(牛、马科动物) 0.5 ? 肾脏(牛、马科动物) 0.5 ? 牛乳 0.05 中国大陆 克仑特罗及其盐、酯 动物性食品 不得检出 中国大陆 盐酸克仑特罗 所有食品 不得检出 ? 马肉 0.2 ? 猪肉 不得检出 ? 羊肉 0.2 日本 ? ? ? 克仑特罗 肝脏(猪) 不得检出 ? 肝脏(牛) 0.6 ? 禽肉 不得检出 ? 奶 0.05 不同国家或地区CLB残留最高限量 目前，瘦肉精常用的仪器检测方法有气相色谱-质谱法(GC-MS)、高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫吸附法(ELISA)、胶体金免疫层析法(Colloidal gold immunochromatography)、中空