第五章 沙门氏菌的检验.ppt

第五章 沙门氏菌的检验 本章重点掌握： 1、食品中沙门氏菌的检验原理 2、食品中沙门氏菌的检验方法 一、沙门氏菌属简介 沙门氏菌分为三大类群 第一类群：专门对人致病 第二类群：食物中毒沙门氏菌群 第三类群：专门对动物致病 事例 俄亥俄州国王坚果公司生产的５磅（2.27千克）重罐装花生酱中含有沙门氏菌。国王坚果公司１０日发表声明说，接到明尼苏达州方面的通报后，公司立即决定全部召回公司及其下属两家公司生产的花生酱。 美国疾病控制和预防中心１２日发表的新闻公报又将国王坚果公司推向风口浪尖。公报说，自去年９月以来，美国共有４３个州发现沙门氏菌 疫情，染病人数达到４１０人，并有 ３人被怀疑在感染沙门氏菌后死亡。 调查发现，几乎所有感染沙门氏菌的 患者都食用过花生酱，并且大多数人 食用的都是国王坚果公司的５磅重罐 装花生酱。 人民网12月7日电 美国牛肉包装公司日前宣布，将从亚利桑那州和新墨西哥州的多家超市召回大约10吨牛肉馅。据悉，这些牛肉馅遭一种有抗药性的沙门氏菌污染，目前已经造成多人因食用这批牛肉而生病。这是该公司今年在美国境内第二次发出召回牛肉馅的通知。　　今年8月，这家牛肉公司也曾召回了将近400吨牛肉馅。当时，那批产品造成至少39人生病。对免疫系统虚弱的老年人和幼儿来说，这些被沙门氏菌污染的牛肉馅可能带来致命后果，其症状包括腹泻、高烧、 肚子疼和呕吐。由于 这种沙门氏菌具有强抗 药性，因此更加危险。 生物学特性 形态染色特征： 革兰氏阴性，大小为1-3×0.4-0.9μm的两端钝圆的短杆菌，无芽孢，一般无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌以外，都有周身鞭毛，运动力强，具菌毛。 培养特性： 沙门氏菌需氧或兼性， 10～42 ℃都可生长，最适生长温度为37℃，最适pH为6.8～7.8。 营养琼脂平板上：35～37℃培养18～24h，其菌落大小一般为2～3mm，光滑、湿润、无色、半透明、边缘整齐。 血平板：中等大小、灰白色菌落。 抵抗力 不耐热，55℃1h或者60℃15-30min即可杀死 普通水中可生存2-3周，粪便中存活1-2月 在牛乳和肉类，存活数月，腌肉中存活2-3月 冷冻对沙门氏菌无杀灭作用，即使在-25℃低温仍可存活10个月左右 沙门氏菌的来源 家畜、家禽的生前感染和宰后污染 乳中沙门氏菌的来源 蛋类沙门氏菌的来源 熟制品中沙门氏菌的来源 沙门氏菌属流行病学特点 发病率及影响因素 沙门氏菌食物中毒发病率较高，占总食物中毒的40％～60％，最高可达90％ 沙门氏菌致病力强弱与菌型有关 沙门氏菌致病力强弱与易感人群有关 沙门氏菌在BS平板上 沙门氏菌在HE平板上 沙门氏菌的TSI试验 赖氨酸脱羧酶试验 血清学鉴定 一般采用1.5%琼脂斜面培养物作为玻片凝集试验用的抗原。 用A～F多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。在生理盐水中自凝者为粗糙形菌株，不能分型。 沙门氏菌检验——几点注意 冷冻样品解冻需在45℃以下，有自动调温器自控的水浴锅内不断搅拌进行15min或在2-8℃，18小时内软化。 为保证检验的准确性，必须在选择性培养基上挑取足够数量的菌落进行生化和血清学鉴定。 进行生化反应时，应以纯培养物进行试验，如出现血清学阳性，而生化反应特征不符合时，应对接种物进行纯化，用纯化后的培养物重新进行生化试验。 测试中应同时接种阳性对照菌株。 沙门菌仪器检测法 VIDAS（生物梅里埃公司） BAX （杜邦公司） 沙门菌仪器检测法 VIDAS 应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪 ，用荧光分析技术通过固相吸附器，用已知抗体来捕捉目标生物体，然后以带荧光的酶联抗体再次结合，经充分冲洗，通过激发光源检测，即能自动读出发光的阳性标本，其优点是检测灵敏度高，速度快，可以在48小时的时间内快速鉴定沙门氏菌、大肠杆菌O157：H7、单核李斯特菌，空肠弯曲杆菌和葡萄球菌肠毒素等。 沙门菌仪器检测法 DUPONT Qualicon BAX System 应用DNA分子核酸探针或基因探针技术制造的全自动PCR分析仪。将已知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法标记，加入已变性的被检DNA样品中， 在一定条件下即可与该 样品中有同源序列的 DNA区段形成杂交双链， 从而达到鉴定样品中DNA 的目的。 商品化生化鉴定系统 VITEK GNI+ 应用一系列小的多孔的聚苯乙烯卡片进行测试，卡片含有干燥的抗菌药物和生化基质。先制备一定浓度的欲鉴定菌株的菌悬液，然后将菌悬液接种到各种细菌的小卡上，将其放入具有读数功能的孵箱内，每隔一定