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不同番茄材料黄化曲叶病毒病抗性研究 摘 要 番茄 （Lycopersiconesculentum Miller ）最早发现于南美洲的亚热带地区，营养价值 非常高、果实味道可口、食用方式多样，世界各地均有大量设施栽培番茄种植。番茄的 大量种植和生产也带来了一系列的问题，主要包括逆境条件的限制以及病虫害的流行和 传播。番茄黄化曲叶病毒病（Tomato yellow leaf curl virus disease ，TYLCVD ）是影响番 茄生产的主要病害之一，该病害的显著流行特征是传播速度快，范围广，来势猛等，大 面积发病时会造成栽培地大量减产和绝收，严重影响了番茄的产量和品质。通常采用的 防治措施为化学药剂防治，但容易造成环境污染、农药残留等问题，因此并未取得理想 防治效果。选育抗病品种优势明显，绿色、环保、高效、针对性强等，是目前可以较好 地控制病毒性病害的有效方法和手段，可以从根本上解决病害对番茄的影响，对番茄产 业的长足发展具有重大现实意义。一般来说，新品种的选育技术包括 PCR 鉴定和自然 接种鉴定等。鉴定方法比较单一，缺乏可靠性。因此，本研究从抗病表型、生理生化特 性、分子三个方面出发，以15 份自育的无限生长型番茄材料为试材，抗TYLCVD 品种 齐达利和感病品种Money Maker(MM)为对照，采用苗期农杆菌接种法，通过TYLCV 病 毒检测及抗性评价，生理生化特性、抗病基因（Ty-1、Ty-2 、Ty -3 ）检测及表达量的研究， 探究了不同时期的抗性变化规律，筛选出了可作为抗 TYLCVD 的优良番茄品系。取得 以下研究结果： （1）对不同番茄材料进行 TYLCV 病毒检测和抗性评价发现，所有番茄材料中均 检测到病毒存在，853、857、867、齐达利抗TYLCVD 能力较强，表现为免疫，817、 842 表现为高抗。其中病情调查结果显示：随着时间的推移，除免疫和高抗品系外，其 他材料的病株率和病情指数均呈上升趋势，20 d 到30 d 上升趋势最快并在40 d 时达到 峰值。接种20d 时，805、817、819、820、841、842 表现为高抗，853、857、867、齐 达利表现免疫，证明在感病初期对TYLCVD 是有一定抗性的；接种30 d 时，感病材料 病株率和病情指数上升明显，801、802、806、822、MM 发病率和病情指数均较高，与 其它材料有显著性差异(P＜0.01 , P＜0.05) ；接种40 d 时，大部分感病品系病株率和病情 指数有缓慢上升并趋于平稳，感病情况较30 d 时变化不大，证明在40 d 时已经充分发 病。801、802、803、806、822、MM 病株率和病情指数达到峰值，发病最为严重，与 其它材料有显著性差(P＜0.01 , P＜0.05) ，是非常典型的感病品种。 （2 ）通过对抗病性与生理生化特性的研究表明，853、857、867、齐达利的抗氧化 I 甘肃农业大学2020 届硕士学位论文 酶活性、防御酶活性、次级代谢物含量均普遍高于其他材料。供试材料中齐达利的SOD 活性、867 的CAT 活性、853 的APX 活性较高且同其他材料相比有显著性差异（P ＜0.05 ）； 853、857、867 的防御酶(PAL、PPO 、POD)活性在发病初期均达到峰值，其他感病材料 酶活性峰值则出现较晚。齐达利的PAL 活性、POD 活性以及齐达利、857、867 的PPO 活性较高且同其他材料相比有显著性差异（P ＜0.05 ）；853、857、867、齐达利总酚含 量较高且在接种20 d 时就可达到峰值，其他感病材料则出现较晚。853、齐达利类黄酮 含量在接种20 d 时出现峰值，857、867 类黄酮含量峰值在接种30 d 时出现。857 的总 酚含量和类黄酮含量同其他材料相比有显著性差异（P ＜0.05 ）。 （3 ）对抗病基因检测及不同时期基因表达量的研究可以得出，含有纯合 Ty-1 和 Ty -3 基因的853、857、867 对 TYLCV 抗性更高，同时抗TYLCV 基因表达量整体高于 其他感病材料。只要含抗病基因（Ty-1、Ty-2、Ty-3 ）的接种材料均表现出不同程度的抗 性。867 的Ty-1 基因表达量同其他材料相比有显著性差异（P ＜