中药综合检验技术 应用和典型工作任务 定性定量分析的基本方法.pptVIP

山东中医药高等专科学校 Shandong College Of Traditional Chinese Medicine 无机与分析技术 基础化学教研室 叶国华 定性与定量分析方法 定性与定量分析方法 一、定性分析的方法 1. 对比吸收光谱的一致性 丹参注射液紫外光谱 比较样品化合物的吸收光谱特征与标准化合物的吸收光谱特征；或与文献所载的化合物的标准谱图进行核对。 同一物质有相同吸收光谱图，反之不一定是同一物质。 2.对比吸收光谱特征数据 在不同化合物的吸收光谱中，最大吸收波长可以相同，但因摩尔质量不同，它们的吸光系数有明显差异，因此在比较 的同时再比较（ ）或（ ）则可加以区分。 例如 甲基麻黄碱和去甲基麻黄碱均为251nm、257nm、264nm但可从二者的摩尔吸光系数加以区别。 甲基麻黄碱 251nm（lgε2.20），257nm（lgε2.27）， 264nm（lgε2.19） 去甲基麻黄碱 251nm（lgε2.11），257nm（lgε2.11）， 264nm（lgε2.20） 一、定性分析的方法 3. 对比吸光度（或吸光系数）的比值 吸收峰较多的化合物，而各吸收峰对应的吸光度或吸光系数的比值是一定的，可作为定性鉴别的依据，不同的最大吸收波长处的吸光度（与标准品在相同条件下测定）的比值是用于鉴别化合物的特性。 361nm 550nm 278nm 一、定性分析的方法 如维生素B12的吸收光谱有三个吸收峰，分别为278nm、36lnm、550nm。2015年版《中国药典》规定，作为鉴别的依据，361nm与278nm吸光度的比值应为1.70～1.88；361nm 与550nm的吸光度比值应为3.15～3.45 361nm 550nm 278nm 一、定性分析的方法 （一）单组分样品的定量方法 1.标准曲线法 ①配制一系列不同浓度的标准溶液，选择 合适的参比溶液，在相同条件下，以待测组分 的最大吸收波长λmax作为入射光，分别测定各 标准溶液对应的吸光度。 ②以浓度c为横坐标、吸光度A为纵坐标 描绘曲线，称为标准曲线，也叫工作曲线。 ③按照相同的实验条件和操作程序，用待测溶液配制未知试样溶液并测定其吸光度A样，在标准曲线上找到与之对应的未知试样溶液的浓度c样 。 标准曲线 二、定量分析的方法 绘制标准曲线注意以下几点： ①配制系列标准浓度的溶液，浓度范围应包括未知样品溶液浓度可能变化的范围，至少做5个点。 ②测定每一浓度至少作两个平行，两个平行吸光度值相差不大时，取其平均值。 ③绘制标准曲线，也可用直线回归方法计算样品溶液浓度。 ④工作条件改变，应重新绘制标准曲线。 二、定量分析的方法 二、定量分析的方法 2.标准对照法 与标准品的已知浓度比较 因是同种物质，故 K标＝K样；因吸收池厚度相同，即L标=L样。所以： 需要指出的是c样为稀释溶液浓度，若求原样品溶液中组分的浓度，应乘以稀释倍数。即：c原样＝c样×稀释倍数。 　 若样品质量及稀释度与标准品完全一致，则： 精密量取KMnO4试样溶液5.00 mL，加水稀释到50.0mL。另配制KMnO4标准溶液的浓度为20.0μg·mL-1。在525nm处，用1cm厚的吸收池，测得试样溶液和标准溶液的吸光度分别为0.216和0.240。求原试样溶液中KMnO4的浓度。 例 题 二、定量分析的方法 3.吸光系数法 根据朗伯-比耳定律A＝KcL，已知吸收池厚度L和吸光系数ε 或E ，根据测得的吸光度A算出溶液的浓度或含量。 c原样 = cs×稀释倍数 二、定量分析的方法 维生素B12水溶液，在λmax=361 nm处的 值为207，盛于1cm吸收池中，测得溶液的吸光度A为0.518，求溶液的浓度。 解：根据光的吸收定律，溶液的浓度为 例 题 二、定量分析的方法 精密称取维生素C 0.0500g，溶100mL0.005mol/L硫酸溶液中，再取此溶液2.00mL，准确稀释至100mL，取此溶液置于1cm 比色杯中，在245 nm波长处测得吸光度A为0.551。求维生素C的百分含量。（维生素C纯品在上述相同条件下的百分吸收系数E1cm1% =560） 例 题 二、定量分析的方法 解： c原样