（推荐精选）病毒包装与感染.pptVIP

表达载体部分与包装成分互补,仅含有包装、逆转录和整合所需的HIV-1顺式作用元件, 5’端LTR和全部5’端非翻译区域。 包膜表达质粒使用水疱性口炎病毒糖蛋白G基因(VSV-G)用来代替了原病毒的env基因。 表达载体 包膜载体 * 三代慢病毒载体 第二代慢病毒载体系统是在第一代的基础上进行改进 在包装质粒中删除了HIV的所有辅助基因（vif、vpr、vpu和nef） 不影响病毒的滴度和感染能力，同时增加了载体的安全性 第三代慢病毒载体系统由四质粒代替原有的三质粒包装系统。 将rev基因单独放在一个包装质粒上。 增加了两个安全特性：一是构建自身失活的慢病毒载体，即删除了U3区的3′LTR，使载体失去HIV-1增强子及启动子序列；二是去除了tat基因，用异源启动子序列代替，只保留了3个基因(gag、pol和rev)，更加安全。 * lentivirus 包装流程 将293T 细胞传代至60%~70%汇合时，用脂质体法将4 个质粒共转染至细胞。 体外培养24 小时，荧光显微镜下观察，大量细胞表达绿色荧光蛋白，说明质粒转染成功。 培养48小时后，用超速离心收获含慢病毒颗粒的细胞上清液，浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩