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血红蛋白含量测定
血红蛋白(hemoglobin,Hb)是一种含铁的色素蛋白,是红细胞的主要内含物,是血
红素和珠蛋白肽链连接而成的一种结合蛋白。血红蛋白占红细胞的32%~36%,古红细胞
干重的96%。
血红蛋白的测定方法很多,如氰化高铁血红蛋白测定法、碱羟高铁血红素(AHD—575)法、沙利氏法等。因沙利氏法简便、快速,目前仍被兽医临床广泛应用。
【原理】
血液与o.Imol/L盐酸作用后,血红蛋白变为棕色酸性血红蛋白,与标准比色柱比色,求出每lOOmL血液中所含血红蛋白的百分数或质量(g).
【器材与试剂】
器材沙利氏血红蛋白计[比色架、标准比色柱、血红蛋白测定管、沙利氏吸管(也称为血红蛋白吸管,上面有两个刻度,分别为10弘L和20yL,专门用于吸取定量血液),见图2 -5]。测定管上有两种刻度,从下往上,一侧有2~24的刻度,表示lOOmL血液中所含血红蛋白的质量(g);另一侧有20~140的刻度,表示lOOmL血液中血红蛋白的百分数。国产的血红蛋白计是以每lOOmL血液含14. 5g血红蛋白为100%而设置的。另外还需小玻璃棒、滴管、脱脂棉等。
2.试剂0.Imol/L盐酸(也可用1%的盐酸代替)、蒸馏水、乙醇、乙醚。
【测定方法】
(1)于测定管内加入0.Imol/L盐酸至“2”或百分刻度“20”处。
(2)用沙利氏吸管吸取被检血液至“20 t/L”刻度处,并用棉球拭去管外壁血液,迅速将管内血液缓缓吹入测定管内的盐酸底部;再吸取上清液,反复吹吸数次,以洗出沙利氏吸管内黏附的血液。
(3)混匀,将测定管插入比色架内,静置lOmin。
4)沿管壁加入蒸馏水或0.Imol/L盐酸,边加边摇匀,逐步稀释直到与标准比色柱的色调~致为止,读取测定管内液柱凹面的刻度值,即为lOOmL血液中血红蛋白的质量(g)或百分数。
【注意事项】
(1)为减少误差,向测定管内的盐酸中加入血液时要避免气泡产生,如果有气泡产生,可用小玻棒蘸少量95%酒精,然后接触气泡,即可消除。
(2)为使结果更为准确,在读数后再加蒸馏水1滴,如液体色泽变淡,以上一次读数为准;如液体色泽不变淡,则需重新读数,以后一次读数为准。
【正常参考值】动物血红蛋白含量正常参考值见表2-6。
表2-6各种动物血红蛋白正常参考值(沙利氏法)
动物种类
血红蛋白(g/lOOmL)
动物种类
血红蛋白(g/lOOmLJ
黄牛
水牛
奶牛
绵羊
奶山羊
猪
9.55±1.o
12.3±1.66
8.37±0.7
7.2土1.27
8. 33±0.75
11.16±1.42
犬
猫
马
骡
驴
骆驼
L4.9(12.0~18.0)
12.O(8.0~15.0)
12.77+2.05
12.74+2.18
10.99+3.02
11.8±1.03
临床意义
(1)血红蛋白含量增高。常见于因机体脱水而血液浓缩的各种疾病,如腹泻,剧烈呕
吐、大出汗、多尿等,也见于肠便秘、瓣胃阻塞及某些中毒病;真性红细胞增多以及心肺疾病时,由于代偿作用所致的红细胞增多,血红蛋白含量也相应增高。
(2)血红蛋白含量降低。见于各种贫血、血孢子虫病、急性钩端螺旋体病、胃肠寄生虫
病及中毒病。
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