K212 食品快速检测技术、K211 农产品快速检测技术 W2206 MPN 法测生肉中大肠菌群结果分析、W2206 MPN 法检测生肉中大肠菌群结果分析 W2206-4 MPN法检测生肉中大肠菌群结果分析-微教材.docxVIP

农产品与食品质量检测技术教学资源库 PAGE \* Arabic 4 / NUMPAGES \* Arabic 5 《农产品/食品快速检测技术》课程-微教材 微课编号 W2206 微课名称 MPN法检测生肉中大肠菌群结果分析 所属模块（章节） 生物安全快速检测 子模块 微生物快速检测 关键词 MPN表；大肠菌群检测；结果分析 是否通用 √通用 农产品 食品 是否重点建设 √是 否 微课类型 实验实训型 微课形式 PPT动画式 教学设计模式 直观演示法 教学目标 理解MPN表含义； 会使用MPN表查询、计算检测结果； 会选择合适的国家标准进行样品结果评价。 教学内容 知识点 技能点 会样品培养结果的阳性阴性判读； 理解MPN表含义； 会检样量计算方法。 能根据培养管培养结果进行MPN表查询； 会计算特殊检样量情况下结果的计算； 能根据样品选择合适的评价标准。 知识讲解 1、MPN法快速检测食品中大肠菌群的结果判读方法 首先，以无菌操作进行样品稀释；然后选取三个适宜稀释度的样品接种到MUGal肉汤中37℃培养18~24h。接下来，将培养管置于暗处，用波长366nm的紫外灯照射，观察。 判读方法如下：如培养管内溶液显蓝色荧光，为大肠菌群阳性管；如未显蓝色荧光，则为大肠菌群阴性管（见图1）。 图1 MPN法快速检测大肠菌群结果观察 （备注：红色圈出的培养管无蓝色荧光，为阴性结果；其他培养管有蓝色荧光，为阳性结果） 如果培养管中出现了阳性管，则根据大肠菌群阳性管数，查MPN表，报告每100mL（或者每100g）食品中大肠菌群的MPN。 2、MPN表含义 图2为大肠菌群最可能数检索表。最可能的数量英文为most probable number，缩写为MPN。因此，这张表格也称为“MPN表”。大肠菌群检测结果表示的单位是：MPN/100mL(g)，意思是说每100mL或者每100g样品中含有的大肠菌群的最可能数量。 图2 大肠菌群最可能数检索表 （节选自GB/T 4789.32-2002食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测） 边学边练 任务：MPN法检测生肉中大肠菌群结果分析 操作步骤： 一、实训准备 1、标准文本《GB/T 4789.32-2002食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测》； 2、培养管培养结果数据一套。 二、实训步骤 1、计算检样量 查询表格时，是根据大肠菌群阳性管数进行查询的。表格中阳性管数下面出现了三列，代表的是3个稀释度中接种的检样量，每个稀释度接种3管。在检测过程中，我们首先制备十倍稀释系列，再选择其中三个连续稀释度，每个稀释度接种了三管培养基。每管的检样量等于接种量乘以稀释度。 例如：在检测，在第一组培养管中接种了10 mL 稀释度为10-1的样品稀释液， 第一组培养管，每管中的检样量就等于10乘以10-1等于1mL；第二组培养管接种了1 mL 稀释度为10-1的样品稀释液，第二组培养管，每管中的检样量就等于1乘以10-1等于0.1mL第三组培养管中接种了了1mL 稀释度为10-2的样品稀释液，第三组培养管，每管中的检样量就等于1乘以10-2等于0.01mL。 2、查询MPN表，获得检测结果 如果接种的检样量分别为1mL，0.1mL，0.01mL，则，根据每组培养管的阳性管数直接查表，查询到的数值即为样品的大肠菌群最可能数，报告结果即可。 例1：接种的检样量分别为1g,0.1g,0.01g。观察到阳性管数分别3-2-2（观察结果记录见表1），查表得样品中大肠菌群为2100MPN/100g（见图3）。 表1 食品中大肠菌群测定原始记录 稀释度 接种量 检样量 检验结果 （阳性管数） 总计 （MPN） 10-1 10mL 1g 3 2100MPN/100g 10-1 1mL 0.1g 2 10-2 1mL 0.01g 2 图3 大肠菌群最可能数检索表 （节选自GB/T 4789.32-2002食品卫生微生物学检验大肠菌群的快速检测） 例2：接种的检样量分别为1g,0.1g,0.01g，培养后观察到九管都为阳性管，查表得样品中大肠菌群为≧24000MPN/100g。 例3：接种的检样量分别为1mL,0.1mL,0.01mL。观察到九根培养管都是阴性的，记录为0-0-0. 查询MPN表，得到结果为30MPN/100mL，意思就是说每100g样品中大肠菌群最可能数小于30个。 3、检样量变化时，MPN表查询结果的计算 例题：选择稀释度分别为10-2,10-3,10-4进行接种，每管接种稀释液都为1mL，那么这三组培养管中原检样的接种量就分别为0.01mL,0.001mL,0.0001mL。如果培养后阳性管