职业培训中心 食品检验工、食品检验工 检验的前期准备及仪器维护12-气相色谱法及气相色谱仪.docVIP

电子教材 第 第 PAGE 1 页 《检验的前期准备及仪器维护》电子教材 实训项目四 常用食品检验方法及仪器 实训任务三 气相色谱法及气相色谱仪 1.气相色谱法 （1）概述 1906年，俄国植物学家茨维特（M.S.Tsweet）在他研究植物色素的论文中描述了一种分离方法，即用装在玻璃管中的碳酸钙颗粒，将石油醚提取液中的叶绿素分离，这就是现在所说的色谱法。其中固定不动的碳酸钙颗粒被称为固定相，流动的石油醚称为流动相，柱中出现的有颜色的色带称为色谱图。根据流动相的不同，可将色谱法分为气相色谱法和液相色谱法。 气相色谱法是一种以气体为流动相的柱色谱分离技术，是基于色谱柱能分离样品中的组分，检测器能连续响应，能同时对各组分进行定性定量的一种分离分析方法。气相色谱分离的基础是一种样品在流动相和固定相之间的分配。若固定相是一种固体，称之为气固色谱（GSC）。气固色谱取决于用来分离样品的柱填充物的吸附性能。若固定相是一种液体，称之为气液色谱（GLC）。液体像一层薄膜涂在惰性固体上，分离的基础是样品在液膜内外的分配。固定液涂渍在担体上作为柱内填充物时称为填充柱色谱；固定液涂渍在柱内壁时称为毛细管色谱。由于有众多的固定液可以选择，气一液色谱的应用更灵活、更广泛。目前在普通食品、保健食品、食品添加剂、水等的检测中，气相色谱得到广泛的应用。 （2）色谱流出曲线常用术语 1）色谱图与色谱流出曲线：色谱图是指色谱柱流出物通过检测器系统时，所产生的相应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，如图1-10所示。 图1-10 色谱图 色谱流出曲线是指色谱图中随时间或载气流出体积变化的相应信号曲线，也就是一组分流出色谱柱的时间（t）或载气流出体积（V）为横坐标，以检测器对组分的电信号（mV）为纵坐标的一条曲线，如图1-11所示，色谱图上每一个峰代表样品中的一个组分。 图1-11 色谱流出曲线 2）基线：当没有组分进入检测器时，色谱流出曲线是一条只反映仪器噪声随时间变化的曲线，称为基线。操作条件变化不大时，通常可得到如同一条直线的稳定基线。 3）色谱峰：当有组分进入检测器时，色谱流出曲线就会偏离基线，这时检测器的输出信号随检测器中组分的浓度而改变，直到组分全部离开检测器，此时绘出的曲线称为色谱峰。 4）保留值 ①保留时间：从进样起到色谱柱后出现待测组分信号极大值所需要的时间，以tR表示。tR可作为色谱峰位置的标志。 ②保留体积：对应于tR所流过的流动相的体积称为保留体积。则有 （1-18） 式中f0——常压和柱温条件下出口处的流动相体积流速。 ③死时间：是指不被固定相吸附或溶解的惰性组分（如空气），从进样开始到柱后呈现浓度极大值时所需要的时间，以tM表示。 ④死体积：对应于tM所流过的流动相体积，以VM表示。则有 （1-19） ⑤调整保留时间：是指组分的保留时间与死时间之差值，以表示。则有 （1-20） 5）相对保留值：也称为选择系数，指某组分2的调整保留时间与组分1的调整保留时间之比，以α表示。则有 （1-21） 分配系数：在平衡状态时，组分在固定相与流动相中的浓度比称为分配 系数，以k表示。组分的分配系数为 （1-22） 分配比（容量因子）：在一定的温度、压力下，组分在气，液两相间达到 分配平衡时，组分在固定相和流动相中分配量之比，以k′表示。则有 （1-23） k′值是衡量色谱柱对组分保留能力的重要参数，k′值越大，则保留时间越长。k′值为零时，则表明该组分在固定液中不溶解。如果两种化合物的分配性不同，就可能在它们之间进行分离。 8）分离度（分辨率）：两个相邻峰的实际分离程度称为分离度，以R表示。其定义为：相邻两组分色谱峰的保留时间之差与两峰底宽度之和一半的比值，即 （1-24） R值越大，两组分分离得就越完全。一般来说，当R=1.5时，分离程度可达到99.7％，因此，R≥1.5作为相邻两峰得到完全分离的指标。 （3）塔板理论 塔板理论是1941年马丁（Martin）和詹姆斯（James）提出的半经验式理论，他们将色谱分离过程比拟为一个蒸馏过程，即将连续的色谱过程看作是许多小段平衡过程的重复。 1）理论塔板数的计算方法：塔板数越大，分离效率越高。理论塔板数n是评价柱效率的主要指标。理论塔板数的计算公式为 （1-25） 式中n——理论塔板数； tR——组分的保留时间（s）； w1/2——