畜产品检测技术 原理、意义及国标解读 克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的测定意义、原理和方法.docxVIP

电子教材 PAGE 7 《畜产品检测技术》电子教材 克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的测定意义、原理和方法 克罗诺杆菌属的检测意义 （一）克罗诺杆菌属概述 1961年英国Franklin等首次报道了2例产黄色素阴沟肠杆菌致新生儿脑膜炎以后，相继在世界范围内 (美国、冰岛、荷兰等国家)报道了一系列新生儿产黄色素阴沟肠杆菌感染事件。1980年Farmer 等在文献中指出通过DNA杂交他们发现产黄色素阴沟肠杆菌之间DNA一致性可达83%～89%，而产黄色素阴沟肠杆菌与阴沟肠杆菌的DNA共有序列只有31% ～49%，建议对产黄色素阴沟肠杆菌重新分类。最终产黄色素阴沟肠杆菌被认为是一个新的菌种，并以日本微生物学家——Riichi Sakazakii的名字命名，即阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）。2004年2月WHO/FAO就婴儿配方奶粉含阪崎肠杆菌课题召开专家会议，做了初步的危险评估，将阪崎肠杆菌列为婴儿配方奶粉中的A类致病菌。2004年3月，国际食品法典委员会（CAC）的食品卫生委员会（CCFH）同意尽快修订婴幼儿食品卫生操作国际标准，包括阪崎肠杆菌及相关微生物的微生物学标准。然而，最近几年的研究结果建议对阪崎肠杆菌进行新的分类，在阪崎肠杆菌的分类关系发生变化之后，由一个种成为一个新属，即克罗诺杆菌属(Cronobacter spp.)，该属包括6个种和3个亚种，这6个种分别是阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)、苏黎世克罗诺杆菌(Cronobacter turicensis)、都柏林克罗诺杆菌(Cronobacter dublinensis)、穆汀斯克罗诺杆菌(Cronobacter muytjensii)、丙二酸盐阳性克罗诺杆菌(Cronobacter malonaticus)、克罗诺杆菌基因种1(Cronobacter genomospecies 1)。 （二）克罗诺杆菌属分布 婴儿配方粉在制造过程中要经过巴斯德消毒，克罗诺杆菌经过这样的处理后不可能继续存活。因此，终产品中克罗诺杆菌的污染很可能是来自厂房环境、巴斯德消毒后添加热敏感性微量元素的过程或配方粉的冲调期。 1.环境 对环境中克罗诺杆菌的分布情况知之甚少。1990年Muyqens和Kollee为了解环境中克罗诺杆菌的发生率，对其进行了广泛调查，抽检样品包括地表水、土壤、泥浆、朽木、谷类、家畜、牛、生牛乳等，但未从抽检的样品中分离到克罗诺杆菌。2002年Leclercq等从奶酪、碎牛肉、腊肠和蔬菜中分离到克罗诺杆菌，但目前仍不能确定该菌的自然宿主。 2003年Hamilton等从厩螫蝇（Stomoxys calcitrans，图1）肠中分离到克罗诺杆菌，据此认为厩螫蝇幼虫肠道是克罗诺杆菌的环境宿主之一。厩螫蝇在世界范围内广泛分布，以牛、马、狗、猪和人等的血液为食，在牛、猪或马的养殖场所可见该蝇，在牛棚更常见，这使牛乳的污染成为可能。流行病学研究发现厩螫蝇的地理分布和克罗诺杆菌感染直接相关。国际上已有从实验室果蝇肠道内分离到克罗诺杆菌的报道。美国一家疫情控制公司的技术报告中记载舍蝇中存在克罗诺杆菌，但没有确切记录该菌究竟是在舍蝇体内还是体外。Hamilton等从以上报道推测昆虫很可能是克罗诺杆菌的环境宿主。该结论意味着，为了从根本上减少克罗诺杆菌的污染，除了要在生产和产品使用期间实施各项控制措施外，还要在医院和生产环境中加强对蝇的消杀工作。 图1 厩螫蝇（Stomoxys calcitrans）——克罗诺杆菌的环境宿主之一 2.食品及相关用品 2004年Kandhai等从9个工厂和16个家庭(餐桌) 取样147份进行克罗诺杆菌的检测，检测结果显示不同的环境检出率各不相同，但差别无统计学意义。克罗诺杆菌从奶粉、谷类、巧克力、马铃薯粉、意大利面食加工厂和家庭环境中的检出，为该菌在环境中的广泛分布提供了强有力的证据。在设计预防新生儿克罗诺杆菌感染措施时，应该考虑到克罗诺杆菌环境分布的广泛性。值得一提的是与婴幼儿密切相关的食物和用具，例如婴儿配方奶粉、普通奶粉、豆粉、碎牛肉、肉类、香肠、发酵面包、豆腐、蔬菜、水（水管道、水过滤膜）、调味品、干酪、婴儿配方粉冲调用具（搅拌器、勺子、甁刷）等的卫生状况尤为值得关注。 图2 阪崎肠杆菌（克罗诺杆菌属）DNA“指纹图谱”比对，发现问题食品示意图 3.婴幼儿配方乳粉的污染 婴儿配方粉中克罗诺杆菌的来源包括以下2种情况：一是内在污染，如加工环境中微生物的存在，加工装置表面微生物的存在，与干燥基粉混合的加入成分中存在微生物。二是外源性污染，例如配方粉调制环境和调制器皿受克罗诺杆菌污染。另外，配方粉或冲调后配方粉