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荧光显微镜的几种荧光光源 本文系小琪和中国显微图像网的原创文章，转载请注 明！ 荧光显微镜是细胞生物学的基本工具。它是由光源、滤色片 和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本 发射荧光，通过物镜和目镜系统放大观察标本的荧光图像而 实现对荧光样品的定性定量研究。 激发、滤光、成像、淬灭，荧光实验的调整就是怎么才能协 调好以上因素得到最好的效果，一个常被忽视的方面是光源 的使用，荧光显微镜的常用光源都是白光光源：高压汞灯和 氙灯，现在还新出了金属卤素灯和 LED 。 1、汞灯 超高压汞灯 （50-200W ），它是用石英玻璃制作， 中间呈球形， 内充一定数量的汞，工作时由两个电极间放电，引起水银蒸 发，球内气压迅速升高，当水银完全蒸发时，可达 50～ 70 个标准大气压力， 这一过程一般约需 5～ 15min 。超高压汞灯 的发光是电极间放电使水银分子不断解离和还原过程中发 射光量子的结果。它发射很强的紫外和蓝紫光，足以激发各 类荧光物质，因此，为荧光显微镜普遍采用。 推荐产品：欧司朗 50W ，103W，200W 汞灯，适用于各大厂 家高端荧光显微镜；一般 200 小时寿命，最长 400 小时。 2、氙灯 氙灯和汞灯做为白光源，都能提供从紫外到近红外一系列波 长的光，但它们却有着不同的激发光谱。 汞灯集中在近紫外、 蓝光以及绿光附近，这种在峰值的高激发能量确保产生明亮 的荧光信号， 但光毒性却很强。 因此， HBO 用来对固定样品 或弱荧光成像。相比而言，氙灯光源的激发比较平缓，可以 用于不同波长间强度的比较，例如用于钙离子浓度测量等。 氙灯的强激发在近红外 800-1000nm 。 XBO 较 HBO 的特点： 1）光谱强度更均匀 2）在红外及中红外仍有较强光谱强度 3）能量较强更易到达物镜后孔径 推荐产品： XBO75W ，100W 氙灯；寿命一般 400 小时， 1200 小时 3、金属卤素灯 这是近年来出现的一种光源，它和汞灯的激发光谱很像，但 它和显微镜以光纤相连，能散热，寿命更长。光纤从光源连 到显微镜上，可以大量减少光产生的热能。金属卤素灯对活 细胞成像的另一个优势是内置强度设计装置，可以容易调节 激发光。 推荐产品： EXPO 公司 X-cite 光源， 120W，适用于各大厂家 高端荧光显微镜；寿命 2500 小时以上。 4、近来，还出现了一种新的荧光光源： LED ，这种光源的开 关在毫秒间，减少样品在光照下的暴露时间，延长寿命。另 外， LED 光的衰减即快又精确，长期活细胞试验下可大大减 少光毒性。和白光相比， LED 仅仅在一个较窄的光谱激发， 多个 LED 波段使得 LED 光源能为多色荧光提供应用。 推荐产品：蔡司 Colibri ，寿命普遍在几千个小时。 发布时间 :2016-03-24 21:02 来源 :中国显微图像网 作者 : 匿名