生化及分子生物学 蛋白质的一级结构 2-12蛋白质一级结构的测定.pptx

将肽段顺序进行叠联以确定完整的顺序;基本策略： 片段重叠法＋氨基酸顺序直测法 基本步骤： (1) 分离纯化蛋白质，测定氨基酸 种类、数目、含量； (2) 进行末端分析，确定多肽链数目， (3) 拆分多肽链，断开多肽链内二硫键； (4) 用两种以上方法裂解多肽链成较小的片段，分别分离纯化 (5) 测定各肽段的氨基酸顺序； (6) 确定半胱氨酸残基间形成二硫键交联桥的位置； (7) 片段重叠法重建完整多肽链一级结构。;;多肽N、C-末端氨基酸的测定;Edman化学降解法;3、转化反应;丹磺酰氯(dansyl chlorid) 末端分析（DNS法）;C-末端分析:肼解法;多肽链的部分裂解;溴化氰断裂法;消化道内几种蛋白酶的专一性