传递窗紫外灯表面消毒效果验证.docxVIP

第 第 PAGE 1 页 共 9 页 传递窗紫外灯表面 消毒效果验证 传递窗紫外灯表面消毒效果验证 传递窗紫外灯表面消毒效果验证 编号 Code: 版本 Version: 编写 Prepared by: 日期 Date: 审核 Checked by: 日期 Date: 批准 Approved by: 日期 Date: 生效日期Date of Effective: 目 录 1、概述 4 2、实施日期及时间安排 4 3、验证小组成员 4 4、仪器和设备 4 5、材料与试剂 4 6、验证过程 5 7、验证结果记录 8 8、再验证周期 8 9、相关 SOP 8 10、QA 职责 8 11、修改事项 8 12、文档 8 1、概述 进入微生物室的物品通过传递窗，经过紫外消毒后进入微生物室。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果，特起草本方案对其进行验证。本验证用于 QC 微生物室、无菌室传递窗紫外灯表面消毒效果检查。 2、实施日期及时间安排 2012 年 月 日开始进行验证。 3、验证小组成员 QA 负责验证方案的批准 QA 负责验证方案的批准 QC 负责验证方案、验证报告的审核、组织验证方案 的培训和实施 负责验证方案和验证报告的起草 验证方案的实施 4、仪器和设备 仪器名称 型号或规格 净化工作台 HS-1300-V 型 菌落计数器 紫外线强度测定仪 稳压器 220V 细菌培养箱 SHP-150 型 霉菌培养箱 GNP-9270 型 5、器材 灭菌刻度吸管（1ml，10ml） 灭菌试管 灭菌平皿 酒精灯 5.5 载体：（1.0×1.0cm 的玻片） 6、材料与试剂 纯化水 营养琼脂培养基 改良马丁琼脂培养基 营养肉汤培养基 改良马丁培养基 金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003] 枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63 501] 大肠杆菌[CMCC（B）44 102] 白色念珠菌[CMCC（F）98 001] 6.10 稀释液（0.1％吐温 80，0.1％蛋白胨溶液） 7、验证过程 试验环境 试验在洁净度 10 000 级下的局部洁净度 100 级的单向流空气区域内进行，全过程严格遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按《医药工业洁净室（区） 悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。 每次操作开始前，开紫外灯照射 1 小时。 培养基的制备 营养琼脂培养基配方： 营养琼脂培养基粉 31.0g 纯化水 1000ml 配制： 根据需要量称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至 7.1±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌 121℃×15 分钟。 改良马丁琼脂培养基 配方： 改良马丁琼脂培养基粉 42.0g 纯化水 1000ml 配制： 根据需要量称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH 至 6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌 115℃×20 分钟。 营养肉汤培养基配方： 营养肉汤培养基 20g 纯化水 1000ml 配制： 称取营养肉汤培养基 20 克，加 1000ml 纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌 121℃×15 分钟。 改良马丁培养基配方： 改良马丁培养基粉 28.0g 纯化水 1000ml 配制： 根据需要量称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解， 调 pH 至 6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌 115℃×20 分钟。 方法验证试验 辐照强度测定 开启紫外灯 5min 后，用中心波长为 253.7nm 的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直 1m 的中心处测量其辐照度值（uW/cm2）。 测量时，电压应稳定在 220V。 普通型或低臭氧型直管紫外线灯（30W），在灯管下方垂直 1m 的中心处，新灯管的辐照度值应≥90 uW/cm2 。使用中的灯管的辐照度值应≥70 uW/cm2 ，低 于此值者应予更换。 照射剂量 表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，照射剂量应达到 7.5×103 uW·s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到 2.53× 104uW·s/cm2。 7.4.2.2 照射剂量计算： 照射剂量（uW·s/cm2 ）＝紫外灯管强度（uW/cm2）×时间（s） 细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定 菌液的制备 接种菌种名称 接种培养基 培养条件 金黄色葡萄球菌新鲜培养 物 营养肉汤培养基 30～35℃培养 18～24 小时 大肠杆菌新鲜培养物 枯草芽孢杆菌新鲜培养物 白色念珠菌新鲜培养物 改良马丁培养基 23～28℃ 培 养 24～48 小 时 金黄色葡