7.4 突变与育种——营养缺陷型的筛选.pdf

第二节 基因突变和诱变育种 （3）营养缺陷型突变株的筛选 营养缺陷型突变株 （auxotrophic mutant ）在生物学基础理论和应用研究 以及生产实践上都有极其重要的意义。 营养缺陷型 （auxotroph ） 某一野生型菌株因发生基因突变而丧失合成 一种或几种生长因子的能力，只有从周围环境或 培养基中获得这些营养或其前体物（precursor ） 才能正常生长繁殖的变异类型，称营养缺陷型。 ①与筛选营养缺陷型 突变株有关的3 类培养基 基本培养基 （ MM，符号为 ［－］） 完全培养基 （ CM，符号为 ［＋］） 补 充培养基 （ SM，符号为 ［A］或 ［B］等） a. 基本培养基 （ minimal medium MM，符号为 ［－］） 仅能满足某微生物的野生型菌株生长 所需的最低成分的培养基，称MM 。 b. 完全培养基 （complete medium，CM，符号为 ［＋］） 凡可满足一切营养缺陷型菌株营养需要 的天然培养基，称为CM 。 一般可在基本培养基中加入一些富含氨 基酸、维生素、核苷酸和碱基之类的天然物 质，如蛋白胨或酵母膏等配制而成。 c. 补 充培养基 （supplemental medium，SM，符号为 ［A］或 ［B］等） 凡只能满足相应的营养缺陷型突变株 生长需要的培养基，称为SM 。 在基本培养基上再添加对某一营养缺 陷型突变株所不能合成的某相应营养物组 成的培养基，可专门选择相应的突变株。 ② 与营养缺陷型 突变有关的3 类遗传型个体 ＋ 从自然界分离到的原始菌株 （A ） 野 生型 （wild type ） - 经诱变剂处理后的突变株 （A ） 营养缺陷型 （auxotroph ） ＋ 经回复突变或重组后产生的菌株 （A ） 原养型 （prototroph ） ③营养缺陷型的筛选方法 （4个环节） 第一步，诱变剂处理 第二步，淘汰野生型 第三步，检出缺陷型 第四步，鉴定缺陷型 第二步: 淘汰野 生型 突变率 10-6 选择培养基: 野生型不生长，缺陷型生长? MM : 野生型生长，缺陷型不长 霉菌 ＋ - 孢子 （A ）/ （A ） ＋ - （A ）生长 MM （A ）不长 孢子 MM ＋ - ＋ 菌丝体 （A ） （A ） （A 生长） 细 菌 ? （过滤、离心） 抗生素法 青霉素法