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加校正因子的主成分自身对照法 一、定义及适用范围 加校正因子的主成分自身对照法，即以主成分作为对照的内标法，校正因子 可以在检测时测定，但需提供杂质对照品，也可在建立方法时将测得的校正因子 载入质量标准，供以后常规检验使用，无需长期提供杂质对照品，但也仅适用于 已知杂质的控制。建议：校正因子在 0.8-1.2 时可不予校正。 校正因子计算公式： f= 式中：f—校正因子； As—杂质对照品峰面积或峰高； Cs—杂质对照品浓度； Ar—待测成分对照品峰面积或峰高； Cr—待测成分对照品浓度。 二、校正因子的测定 在校正因子的研究和使用中，标准物质、色谱条件、溶剂、检测波长等均是 重要的影响因素，研究中需要予以关注。 2.1 校正因子的测定需要用到特定杂质及主成分的标准物质，这些标准物质 应具备量值准确的特点，符合标准物质（对照品）的相关要求；其次，确定校正 因子的分析方法应与最终确定的质量标准方法一致，色谱条件等需经筛选优化后 确定，如有变更，需考虑对校正因子的影响，必要时重新确定；第三，要关注影 响待测物 UV 吸收的各种因素，如溶液制备所用溶剂最好与最终确定的流动相相 同，检测波长最好在特定杂质及主成分 UV 曲线的峰或谷处，避开吸收值急剧变 化波段，以保证测定方法具有较好的耐用性，并保持测定结果的恒定。 2.2 一般情况下，校正因子可视具体情况通过如下几种方法确定： （1）单浓度点测定：制备适当浓度的特定杂质对照品溶液和主成分对照品溶液， 分别进样测定，照上式计算，得到校正因子。 （2）多浓度点测定：制备适当的高、中、低三水平浓度的特定杂质对照品溶液 和主成分对照品溶液（涵盖定量限、标准限度），分别进样测定，照上式计算各 校正因子，计算 RSD ，求平均值，得到校正因子。 （3）标准曲线法测定 ：精密称取杂质对照品和主成分对照品，分别制备系列溶 液（涵盖定量限、标准限度），分别进样后，按最小二乘法以进样量对响应值（峰 面积等）进行线性回归，求得两条标准曲线，两曲线斜率之比即为校正因子。 （4）吸收系数比值法：对于 UV 检测器来讲，两物质的相对校正因子实际上也 是两物质以流动相为溶剂，在检测波长处的紫外吸收系数 E1%1cm 之比，故可按吸 收系数法测定法的相关技术要求测定各自吸收系数，如对照品级别的标准物质、 高中低三水平浓度测定、吸收度介于 0.3 ～0.8 之间、至少 5 台不同型号的 UV 分 光光度计、2 份供试液同时平行制备测定、同台仪器 2 份供试液的平行测定结果 不超过±0.5%等。测定两物质的吸收系数后，经统计分析确定两物质吸收系数， 计算比值，求得校正因子。 上述各方法中，（1）和（2）法较为简捷，可以快捷地量化特定杂质与主成 分紫外吸收特征的差异，多用于评估采用主成分自身对照法定量杂质时是否需要 校正。但如采用加校正因子的主成分自身对照法定量杂质，需将标准物质赋值信 息转化为校正因子固化在质量标准中，那么校正因子的准确性非常关键，校正因 子的准确计算应符合更为严格的要求，需要考虑并控制求算校正因子过程中的各 种误差因素，以及仪器通用性和色谱系统的耐用性等因素，以便使求得的常数更 为准确并具代表性，此时采用（3）、（4）法更为适宜，如能考虑到测定人员、不 同试验室因素的影响，会更加符合常数求算的基本要求。 三、方法验证 校正因子的测定属于有关物质方法验证中的一个项目，一般采用有关物质的 测定方法，杂质对照品和主成分对照品线性浓度从定量限至限度的 120%或 150%， 一般取 5-6 个点，使用 3 台不同的仪器测定，按照上述方法（3），计算平均校正 因子。 有关物质方法学验证主要包括： 系统适用性、方法专属性、精密度（仪器精密度、方法精密度和中间精密度）、 线性、准确度（已知杂质的回收试验）、检测限和定量限、溶液稳定性和耐用性。 试验内容 概念 溶液配制份数 进样针数 评定标准 杂质峰峰面积 系统适用性是