DAD检测器资料（整理）.docVIP

PAGE PAGE 1 VWD和DAD两种检测器的区别?? 1.VWD和DAD两种检测器都属于高效液相色谱仪器的组成部分，只是两者设计有区别，使用有差异而已； 2.VWD只能进行某一特定波长的检测，即事先设定好某一波长，然后在此波长下对流经色谱柱的样品进行检测；DAD检测器可以进行全波长检测，一般是从190nm到400nm的范围扫描，扫描结束后得到一张三维图谱，坐标分别是运行时间、吸收值和波长值，当然你也可以从中调出任何一张波长范围在190nm到400nm的色谱图，此三维图对有关物质检查时的波长选择比较有帮助； 3.关于峰纯度的问题，在DAD检测器上，检查某一色谱峰（A）的峰纯度，首先要对A进行恰当的积分，然后选择合适的参比（分自动和手动，一般选自动，特殊情况下选手动），再选择波长范围（210nm-400nm较合适吧，再低会有基质的末端吸收干扰，会影响峰纯度检查的可信度，当然这要看具体的流动相及等梯度情况啦），之后选择固定阈值（国家局要求在990及以上），最后点一下要测的主峰就可以了。我简单的说一下峰纯度检查的原理吧，是这样的，当要检查某一色谱峰的峰纯度（A）时，软件会在A的起始点、前半中点、顶点、后半中点和结束点（共5点）分别取紫外全扫描图来进行拟合度检查，当拟合度大于阈值（即上述的990）时，软件默认为A的五个点都是一种物质，即A是一种物质的紫外吸收峰，纯的，相反，当拟合度低于阈值时，软件默认A的五个点不是一种物质，即A是两种或两种以上的物质的紫外吸收峰，不纯，就要再进行条件的优化分开它们了。所以峰纯度检查是选择有关物质检查色谱条件的重要环节之一，也就是方法的专属性啦。 安捷伦一般是选择光谱归一化法计算峰纯度，简单的说就是从色谱峰上选择5个点（峰起始点、峰上升一半处的点，峰顶点、峰下降一半处的点及峰的结束点，当然作为DAD也可以选择更多），提取这5个点的光谱图进行叠放，看其重合程度来判断色谱峰纯度。取这5个点的纯度因子平均值和阈值比较（一般采用固定阈值990即可），大于990即为纯峰，反之则为不纯。欲详细了解可参阅附件中说明书。