《大小鼠实验动物的一般操作技术》.pptVIP

大小鼠实验动物的一般操作技术 * 实验动物一般操作技术（一） ―――大鼠、小鼠 * 3R原则 体外替代实验（目前在国际上被承认的体外替代实验的方法） 皮肤刺激实验 眼刺激实验等 体外替代实验 * 1.了解动物实验的目的和意义 2.了解实验动物选择和染毒途径。 3.掌握大、小鼠实验的基本操作技术。 一、实验目的： * * 1. 实验动物的选择 2. 实验动物的抓取和固定 3. 性别鉴定 4. 实验动物编号标记 5. 实验动物染毒途径和方法（灌胃、腹腔注射、尾静脉注射） 6. 生物标本的采集 （鼠尾取血、眼眶取血） 7. 实验动物的处死 二. 实验内容： * 实验流程 * 动物物种选择基本原则： 动物的选择 * 健康动物首先看外观： 体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，反应行动灵活。 有无明显疾病症状 体重、年龄 小鼠3周体重约为10~15g，大鼠3~4周体重约为50~70g 外观观察 * 动物的抓取和固定 注意抓取动物的手法 抓取固定时力量大小适宜 * 未成熟鼠生殖器发育不明显，肛门与生殖器之间的距离来区分。远——♂、近——♀。 成年鼠：雄性卧位可见睾丸，雌性可见腹部有12个乳头。 性别鉴定 * 常用标记，两种染料（苦味酸和中性红或品红） 动物的编号标记 * 原则： 同一实验中，实验动物的年龄尽可能一致，实验动物体重大致相近； 同组、同性别动物体重差异应小于平均体重的10%；不同组间同性别动物体重均值差异小于5%；♀♂动物各半，且♀♂实验结果分开统计、分析。 称重 编号 随机分组 实验动物的分组 * 经口染毒（喂饲、灌胃、吞咽胶囊等） 经呼吸道染毒（静式、动式和气管内注入） 经皮肤染毒 注射染毒（皮下、皮内、肌内、腹腔和鼠尾静脉注射等） 其它（直肠内、鼻腔等） 实验动物染毒途径和方法 * 灌胃 抓取老鼠时应是鼠 成竖直线 灌胃成功时，所遇阻力较小 灌胃时注意胃容量 * 腹下1/3外侧，避免损伤实质器官 扎入时有“落空感”，回抽无尿液或血液 腹腔注射 * 从远端进针 注意拽鼠尾时不要用力过大，以免损伤鼠尾或使小鼠致死 尾静脉注射 * 血液采集（断尾采血、眼眶采血、动脉采血等） 尿液采集 胆汁采集 粪便采集 生物标本的采集 * 眼眶后静脉丛采血 * 脊椎脱臼法（断髓处死）：大、小鼠 断头法；急性大失血法；（摘取眼球法）击打头部法；麻醉后急性放血法； 开放性气胸法。 动物的处死 * 报告要求书写整洁，过程明了 内容包括： 实验目的，主要的实验内容，各项实验内容的主要的操作手法及注意事项（内容可和后面的讨论一起写，按照每一个小问题来答题） 实验讨论： 大动物要求： 某公司现研发出一种新型农药要做产品登记，请根据今天所学的内容设计一个简要的一般毒性试验方案（主要是操作思路和关键手法）。 1.实验目的。 2.实验过程：包括（1）动物的选择和分组；（2）选取两种染毒方式；（3）关键的操作步骤。 3.实验心得体会。 小动物要求： 1、大、小鼠的抓取和性别判断；2、实验动物的标记方法；3、实验动物的分组方法；4、实验动物的染毒途径和方法（灌胃，腹腔注射和尾静脉注射方法）；5、动物的处死方法。 （还可包括实验中你觉得那些操作的手法自己不适合，或那些实验步骤需要改进等，还可有其他的关于这堂课相关的扩展知识都可上） 三、实验报告书写和实验讨论： * * * *