谷氨酸生产基本工艺.docVIP

生物工程专业综合实训 生物工程专业综合实训 （ 20XX 年 11 月 谷氨酸生产工艺 摘要： 谷氨酸做为一个人体所必需氨基酸，在生命生理活动周期中含有很大作用。不仅参与多种蛋白质合成，组成人体结构，还做为味精能够给我们带来味蕾上享受。现代生产谷氨酸工艺关键是利用微生物发酵提取而来。不一样发酵方法和不一样发酵条件会造成产量很大不一样。此次谷氨酸生产工艺，关键是掌握发酵方法和发酵条件控制，还有多种仪器使用方法。经过测得数据来观察菌种生长改变，同时谷氨酸发酵工艺各个工段原理和使用方法。 关键词：谷氨酸；发酵；工艺；等电点。 引言 谷氨酸是一个酸性氨基酸，是生物机体内氮代谢基础氨基酸之一，在代谢上含相关键意义。不管在食品、化妆品还是医药行业，谷氨酸全部有很大用途。? 谷氨酸在生物体内蛋白质代谢过程中占关键地位，参与动物、植物和微生物中很多关键化学反应。医学上谷氨酸关键用于诊疗肝性昏迷，还用于改善儿童智力发育。食品工业上，味精是常见仪器增鲜剂，其关键成份是谷氨酸钠盐。过去生产味精关键用小麦面筋（谷蛋白）水解法进行，现改用微生物发酵法来进行大规模生产。不管在食品、化妆品还是医药行业，谷氨酸全部有很大用途。? 谷氨酸钠俗称味精，是关键鲜味剂，对香味含有增强作用。谷氨酸钠广泛用于食品调味剂，既可单独使用，又能和其它氨基酸等并用。用于食品内，有增香作用。甘氨酸含有甜味，和味精协同作用能显着提升食品风味。谷氨酸作为风味增强剂可用于增强饮料和食品味道，不仅能增强食品风味，对动物性食品有保鲜作用。 谷氨酸介绍 谷氨酸一个酸性氨基酸。分子内含两个羧基，化学名称为α-氨基戊二酸。谷氨酸是里索逊1856年发觉，为无色晶体，有鲜味，微溶于水，而溶于盐酸溶液，等电点3.22。大量存在于谷类蛋白质中，动物脑中含量也较多。谷氨酸在生物体内蛋白质代谢过程中占关键地位，参与动物、植物和微生物中很多关键化学反应。医学上谷氨酸关键用于诊疗肝性昏迷，还用于改善儿童智力发育。食品工业上，味精是常见仪器增鲜剂，其关键成份是谷氨酸钠盐。过去生产味精关键用小麦面筋（谷蛋白）水解法进行，现改用微生物发酵法来进行大规模生产。? ??谷氨酸是生物机体内氮代谢基础氨基酸之一，在代谢上含相关键意义。L－谷氨酸是蛋白质关键组成成份，谷氨酸盐在自然界普遍存在。多个食品和人体内全部含有谷氨酸盐，它即是蛋白质或肽结构氨基酸之一，又是游离氨基酸，L型氨基酸美味较浓。? ??L－谷氨酸?又名“麸酸”或写作“夫酸”，发酵制造L－谷氨酸是以糖质为原料经微生物发酵，采取“等电点提取”加上“离子交换树脂”分离方法而制得。 谷氨酸产生菌关键是棒状类细菌，这类细菌中含质粒较少，而且大多数是隐蔽性质粒，难以直接作为克隆载体，而且这类菌遗传背景、质粒稳定尚不清楚，在这类细菌这种构建适宜载体困难较多。需要对它们进行改建将棒状类细菌质粒和已知质粒进行重组，构建成杂合质粒。受体菌选择短杆菌属和棒杆菌属野生菌或变异株，尤其是选择谷氨酸缺点型变异株为受体，便于从转化后杂交克隆中筛选产谷氨酸个体，用谷氨酸产量高野生菌或变异菌作为受体效果愈加好。供体菌株选择短杆菌及棒杆菌属野生菌或变异株，只要含有产谷氨酸能力全部可选择, 但选择谷氨酸产量高菌株作为供体效果最好。这么就能够较轻易地在棒状类细菌中开展各项分子生物学研究。有了适宜载体及其转化系统后，就可经过DNA体外重组技术进行谷氨酸产生菌改造。这对以后谷氨酸发酵低成本、大规模、高质量有较大发展空间。 实训内容 菌种培养、种子扩培、发酵、提取、脱色结晶干燥、谷氨酸成品 试验材料 菌种：天津棒杆菌 药品：胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、NaOH、葡萄糖、尿素、硫酸镁、磷酸二氢钾、D-生物素、硫酸亚铁、硫酸锰、消泡剂、氨水、1mol/LHCl、蒸馏水、1mol/LNaOH、无水乙醇 设备：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、发酵罐、721分光光度计、离心机、磁力搅拌器、天平、恒温振荡摇床 试验方法 （一）斜面菌种制备 无菌条件下，从冷藏天津棒杆菌斜面上，挑取适量菌体涂在LB培养基斜面上，然后置37℃恒温箱培养20—24h。我们采取LB培养基制作固体试管斜面，它是一个常见培养基，LB培养基灭菌条件：在高压蒸汽灭菌锅内保持121℃，0.14Mpa下，20min即可，分装试管，每试管约5—10ml（视试管大小而定）。 （二）种子培养基制备和灭菌 表2 一级种子培养基配方表（400mL） 成份 配比 葡萄糖 2.5%(10g) 尿素 0.5%(2g) 硫酸镁 0.04%(0.16g) 磷酸二氢钾 0.1%(0.4g) D-生物素 (2.5-3.5)2.8mg/L 硫酸亚铁 210g/L 硫酸锰 210g/L 调pH值7.0，121℃,0.14Mpa下，灭菌20mi