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个人总结用clontech的磷酸钙转染试剂包装慢病毒方法
转染24小时前，在10cm培养板接种1.5-3×106个293T细胞，添加10ml的培养基(DMEM+10%FBS)。在37℃，5%CO2条件下过夜。保证在加入转染复合物前培养板
转染前3小时换液为新鲜培养基并加入终浓度为15ul 50mM的Choloroquine。
Vortex转染所需试剂，每个10cm培养板转染样品需准备两个50ml离心管（马振毅等用15ml离心管），按顺序添加如下试剂
Solution A
CDH质粒
3ug
pack A质粒
9ug
pack B质粒
3ug
pack C质粒
3ug
Sterile H2O
至700ul
2M Calcium Solution
87ul
Solution B
2X HBS
700ul
一边轻轻vortex solution A（调节转速确保液体不会溅出）或者一边用1ml一次性移液管往solution A中吹泡泡。逐滴轻轻加入solution B。完成后溶液由于沉淀形成应呈不透明状(promega加入顺序与clontech相反是边混匀B液逐滴加入A液)。
室温孵育15min(promega说明书室温22-25℃30min较适合转染复合物形成)。
将转染复合加入细胞之前再次vortex混匀。逐滴并多位置轻轻滴加入培养板，完全加入后前后来回摇晃培养板以以便沉淀均匀地吸附在细胞表面。
在37℃，5％CO2培养箱中孵育。转染8h后换液(或8-12h)
如果包装的慢病毒质粒携带荧光基团，24-48h后可观察到荧光。
转染30h后再换新鲜培养基。
收集转染48h后的病毒上清（也可再收集72h的病毒）。
option：浓缩病毒。
分装病毒保存于-80℃
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