大鼠S100B蛋白S-100B试剂盒操作方法﹎.pdfVIP

大鼠 S100B蛋白 (S-100B)试剂盒操作方法 检测范围： 96T 4 ng/L -120 ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中 S100B 蛋白 (S-100B) 含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 S100B 蛋白 (S-100B) 水平。用纯化的大鼠 S100B 蛋白 (S-100B) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 S100B 蛋白 (S-100B) ，再与 HRP 标记的 S100B 蛋白 (S-100B) 抗体结合， 形成抗体 -抗原 -酶标抗体复 合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的 作用下转化成最终的黄色。 颜色的深浅和样品中的 S100B 蛋白 (S-100B) 呈正相关。 用酶标仪 在 450nm 波长下测定吸光度（ OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠 S100B 蛋白 (S-100B) 浓度。 试剂盒组成 1 30 倍浓缩洗涤液 20ml ×1 瓶 7 终止液 6ml ×1 瓶 2 酶标试剂 6ml ×1 瓶 8 标准品（ 240 ng/L ） 0.5ml ×1 瓶 3 酶标包被板 12 孔× 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1 瓶 4 样品稀释液 6ml ×1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂 A 液 6ml ×1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂 B 液 6ml ×1/瓶 12 密封袋 1 个 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于 -20 ℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含 NaN3的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（ HRP ）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释： 本试剂盒提供原倍标准品一支， 用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。 120 ng/L 5 号标准品 150 μl 的原倍标准品加入 150 μl 标准品稀释液 60 ng/L 4 号标准品 150 μl 的 5 号标准品加入 150 μl 标准品稀释液 30 ng/L 3 号标准品 150 μl 的 4 号标准品加入 150 μl 标准品稀释液 15 ng/L 2 号标准品 150 μl 的 3 号标准品加入 150 μl 标准品稀释液 7.5 ng/L 1 号标准品 150 μl 的 2 号标准品加入 150 μl 标准品稀释液 2. 加样： 分别设空白孔 （空白对照孔不加样品及酶标试剂， 其余各步操作相同） 、标准孔、 待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样 50 μl ，待测样品孔中先加样品稀释液 40 μl ， 然后再加待测样品 10 μl （样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37 ℃温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水