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* * * * * * 显微观察样品的制备 Contents 样品制备是显微技术的一个重要环节,直接影响着显微观察效果的好坏。一般来说,在利用显微观察、研究生物样品时,除要根据所用显微镜使用的特点采用合适的制样方法外,还应考虑生物样品的特点,尽可能地使被观察样品的生理结构保持稳定,并通过各种手段提高其反差。 光学显微镜的制样 (一)活体观察 方法:采用压滴法、悬滴法及菌丝埋片法等在明视野、暗视野或相差显微镜下对微生物活体进行直接观察。 特点:可以避免一般染色制样时的固定作用对微生物细胞结构的破坏,并可用于专门研究微生物的运动能力、摄食特性及生长过程中的形态变化如细胞分裂、芽孢萌发等动态过程。 压滴法 将菌悬液滴于载玻片上,加盖盖玻片后立即进行显微观察。 1 悬滴法 在盖玻片中央加一小滴菌悬液后反转置于特制的凹玻片上后进行显微观察。为防止液滴蒸发变干,一般还应在盖玻片四周加封凡士林。 2 菌丝埋片法 将无菌的小块玻璃纸铺于平板表面,涂布放线菌或霉菌孢子悬液,经培养,取下玻璃纸置于载玻片上,用显微镜对菌丝的形态进行观察。 3 一般微生物菌体小而无色透明,在光学显微镜下,细胞体液及结构的折射率与其背景相差很小,因此用压滴法或悬滴法进行观察时,只能看到其大体形态和运动情况。 若要在光学显微镜下观察其细致形态和主要结构,一般需要对它们进行染色。 染色前必须对样品进行固定,目的为:一是杀死细菌并使菌体附着在玻片上;二是增加其对染料的亲和力。 2、染色观察 * * * * * *
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