簇毛麦6V#4S特异标记连锁图谱建立与小麦染色体新易位系创制.pdfVIP

摘 要 簇毛麦 （Dasypyrum villosu m (L.) P. Candary, syn. Haynaldia villosa Schur）是小麦的近缘种属， 含有多种有益基因。Pm97033 是小麦-簇毛麦 T6V#4S·6DL 臂间易位系，携带簇毛麦抗白粉病基 因PmV ，广谱高抗小麦白粉病，且其基因序列及其对多数白粉菌株的反应型与位于6V#2S 上的 抗白粉病基因 Pm21 有差异，因此，是 1 个具有潜在应用价值的白粉病优异抗源。然而， T6V#4S·6DL 易位染色体在杂种后代中的遗传传递率较低，在育种上尚未广泛利用。为了解析引 起T6V#4S·6DL 易位染色体遗传不稳定的原因，靶向改造T6V#4S·6DL 易位染色体，促进其在育 种中的利用，本项目通过: (1)开发PmV 和Pm21 基因以及6A，6D 特异的分子标记以便于分子标 记辅助选择；(2)将T6V#4S·6DL 和T6V#2S·6AL 易位染色体同时导入ph1b 突变体的遗传背景中， 以诱导外源染色体臂间的基因重组；(3)辐射处理T6V#4S·6DL 易位系植株花粉以截短6V#4S 的 非靶标区域；(4)利用6V#4(6D)和6V#2(6A) 2 个异代换系杂交及杂种F2 分离群体，构建多态性的 6VS 特异分子标记的遗传连锁图谱，以分析其与小麦，大麦各染色体间同源序列排序保守性的差 异。研究取得以下主要进展： 1. 以中国春第6 同源群的缺体四体系、普通小麦宛7107、易位系T6V#2S·6AL(10SR3109) 、 易位系 T6V#4S·6DL(Pm97033) 、簇毛麦 No.1026(6V#4) 和 D.v#2(6V#2) 为材料，通过在 /Triticum aestivum/Info/Index 和/ 网站上的搜索 获取相关染色体区信息和基因序列，开发PmV 特异标记3 个、Pm21 特异标记5 个、6AS 标记1 个和6DS 的特异分子标记2 个、6AS 和6DS 共显性分子标记1 个。 2. 以中国春CSph1b 突变体为亲本，将其分别与T6V#2S·6AL 和T6V#4S·6DL 易位系杂交， F1 复合杂交，对后代进行染色体特异的分子标记筛选和基因组原位杂交鉴定，在复交 F3 群体中 获得了不同类型的新易位系：T6V#4S·6AL 纯合易位3 株、杂合易位 1 株，6V#2S#4S·6DL 重组 易位1 株。 60 3. 采用不同剂量的 Co-γ 射线辐射处理易位系T6V#4S·6DL 的花粉，利用分子标记的筛选和 基因组原位杂交技术的鉴定，同时结合抗白粉病表型的观察，在杂种F2 代分别筛选到了含有PmV 和不含有基因PmV 的6V#4S 截断的易位系，其中含有该基因的植株表型为抗白粉病，不含有该 基因的植株表型为感白粉病。 4. 利用2 份异代换系6V#2(6A)和6V#4(6D)进行杂交，构建了F1 和F2 分离群体。对F1 代植 株的花粉母细胞进行基因组原位杂交鉴定，证明79.76%的PMCs 中两个外源染色体6V#2 和6V#4 彼此可以配对和交换。在F2 分离群体中，调查了9 个6V 短臂特异的分子标记在323 个F2 群体中 的分离与交换情况，并绘制了9 个标记的遗传连锁图谱。与基于标记同源序列绘制的小麦和大麦 物理图谱对比显示，6V 与大麦6H 基因组和小麦6B 基因组具有较保守的共线性，其次是小麦染 色体6A 和6D 。 5. 利用特异于6VS，6A 和6D 的分子标记辅助选择，从2 份异代换系6V#2(6A)和6V#4(6D) 的杂交F2 群体中，筛选获得 3 种新的染色体代换类型：6V#4(6A)，6V#2(6D)和外源染色体重组 子的异代换系。 关键词：小麦，簇毛麦，易位系，分子标记，基因组原位杂交 I Abstract Daypyrum villosum (Dasypyrum villosu m (L.) P. Candary, syn. Haynaldia villosa Schur), the related species of wheat, cont