甘蓝型油菜每角粒数QTL-qSN.A7的精细定位和细胞学机制解析.pdfVIP

摘 要 目前，我国食用植物油自给率不足35%，严重威胁供给安全。在我国国产植物油中， 菜籽油占比超过55%，而且是品质最优的大宗食用油，因此发展油菜生产是维护食用油供 给安全的关键。目前，制约我国油菜生产的主要问题之一就是产量偏低，亟待提高。在同一 种植密度条件下，油菜单产取决于单株产量，而单株产量直接决定于全株角果数、每角粒数 和粒重三个构成因子。油菜种质资源中每角粒数表现出很大的变异幅度 （从几粒到三十多 粒），这给油菜每角粒数的遗传与育种研究提供了宝贵的材料。目前，油菜每角粒数自然变 异的调控基因和机制基本上不清楚。为此，本课题组前期利用油菜种质资源中每角粒数极端 的代表性品系进行遗传和细胞学分析，发现油菜每角粒数的自然变异主要决定于母体和胚基 因型效应，提出了将每角粒数分解为每子房胚珠数、可育胚珠率、胚珠受精率和受精胚珠发 育率四个子性状的思想并明确其相对贡献，还定位了两个调控每角粒数的可重复性新QTL。 其中qSN.A6为主效QTL位点已精细定位，而qSN.A7的BC F 代QTL近等基因系也已构建。 3 1 在此基础上，本研究先对qSN.A7位点BC F 代近等基因系分离群体中的非重组单株进 3 2 行表型测验确认其效应。然后利用BC F 代近等基因系分离群体中的重组单株对其进行进一 4 2 步精细定位，同时对群体中两种纯合近等基因系单株进行遗传学分析和细胞学观察初步明确 其每角粒数差异形成的机制。获得的主要结果和结论如下： 1、利用qSN.A7侧翼分子标记 （Niab043和CNU339）对BC F 代QTL 近等基因系进行 3 1 筛选，获得杂合种子。杂合单株自交后获得BC F 群体，对其两种纯合单株表型进行比较分 3 2 析，发现两者之间每角粒数有2.23粒的显著差异。 2、利用qSN.A7 侧翼引物 （Niab043 和CNU339）对BC F 大群体2551个单株进行分 4 2 子标记分析筛选到282 个重组单株。随后，在目标QTL 区间 （4.237Mb）开发了5 个特异 性和多态性分子标记对重组单株进行进一步加密。最后，对各重组类型的每角粒数表型数据 进行分析，将其进一步缩小到Ni201和BnID320 之间 （1.389Mb）。 3、为进一步明确qSN.A7 的调控机制，我们利用两种纯合近等基因系进行遗传学和细胞 学分析。首先，我们对两种纯合近等基因系进行人工自交和正反交遗传学实验，结果证明两 者之间每角粒数的差异决定于胚基因型效应。然后，我们对两种纯合近等基因系的每子房胚 珠数、胚珠育性、花粉育性进行细胞学观察，结果证明调查因素均无显著差异。以上实验进 一步证实qSN.A7是通过胚基因型控制每角粒数的，这一机制完全不同于已知位点qSS.C9 和qSN.A6。 研究结果可用于分子标记辅助选择，也为qSN.A7后续的图位克隆和机理解析奠定基础。 关键词：甘蓝型油菜，QTL，每角粒数，精细定位，细胞学机制 I Abstract At present, the self-sufficiency rate of Chinas edible vegetable oil is less than 35%, which seriously threatens the supply security.Among the domestic vegetable oils, rapeseed oil accounts for more than 55%, and is the best quality edible oil. Therefor