玉米穗腐病致病镰孢菌鉴定与寄主抗性.pdfVIP

摘 要 玉米 （Zea mays L. ）是世界上产量最高的粮食作物，是中国的主要农作物之一，在粮食和能 源供应、社会经济与生命科学研究方面都占有重要地位。研究表明，玉米穗腐病致病菌种类繁多， 复杂多变；生产上玉米品种大多表现感病，育种上缺乏有效抗源和可供利用的抗性基因，是穗腐 病普遍发生的重要因素。基于此，本文研究了我国黑龙江省玉米穗腐病致病镰孢菌种群构成及分 布情况，进一步对中国 16 个省市鉴定的优势致病镰孢菌进行了遗传多样性群体结构分析，同时 以掖478 为母本，齐319 为父本构建的重组自交系群体为材料，进行人工接种精准鉴定，在多个 环境中检测与拟轮枝镰孢穗腐病抗性相关的数量性状基因座（QTL ），发掘对环境钝感的抗性基 因位点并进行候选基因分析，以期为育种生产提供抗性基因资源。结果如下： 1. 明确了黑龙江玉米穗腐病致病镰孢的复杂性，禾谷镰孢复合种与藤仓镰孢复合种为主要致 病种。在黑龙江省21 个玉米主产区县采集的143 份病样中检测到以镰孢菌为主的6 属真菌，根 据形态学和分子生物学方法鉴定出 12 种镰孢种，包括禾谷镰孢、拟轮枝镰孢、亚黏团镰孢、层 出镰孢、布氏镰孢、温带镰孢、新知镰孢、变红镰孢、拟枝孢镰孢、早熟禾镰孢、集群镰孢和亚 洲镰孢，分离频率分别为30.00%、16.00%、13.00%、13.00%、12.50%、7.50%、2.50%、2.00%、 1.00%、1.00%、1.00%、0.50%，表明黑龙江玉米穗腐病致病镰孢种类较多，其中禾谷镰孢和拟轮 枝镰孢为优势致病镰孢，亚黏团镰孢、层出镰孢和布氏镰孢亦分布较广，温带镰孢和新知镰孢呈 现小范围分布，拟枝孢镰孢、变红镰孢、早熟禾镰孢以及集群镰孢是首次在黑龙江省玉米穗腐病 中分离得到，研究结果对于全面了解黑龙江地区玉米穗腐病致病镰孢菌具重要参考价值。 2. 黑龙江玉米穗腐病致病镰孢的产毒化学型类型丰富，有潜在较强的产毒能力。对黑龙江省 禾谷镰孢复合种 （亚洲镰孢、禾谷镰孢、布氏镰孢）进行的产毒化学型的分析表明，亚洲镰孢菌 为NIV （雪腐镰孢菌烯醇）产毒类型，禾谷镰孢与布氏镰孢含3 种产毒化学型，其中15-AcDON （15-乙酰基-脱氧雪腐镰孢菌烯醇）产毒类型最多，3-AcDON （3-乙酰基-脱氧雪腐镰孢菌烯醇） 次之，NIV 型最少。禾谷镰孢中的36 株为15-AcDON 产毒类型，20 株为3-AcDON ，4 株为NIV 产毒基因型；布氏镰孢中的14 株为15-AcDON 类型，10 株为3-AcDON ，仅 1 株为NIV 产毒型； 拟轮枝镰孢、新知镰孢、变红镰孢、层出镰孢、拟枝孢镰孢、亚黏团镰孢和早熟禾镰孢均含有产 伏马毒素的关键基因fum1 ，具备产伏马毒素能力，温带镰孢和集群镰孢不含有fum1 基因。 3. 禾谷镰孢复合种和拟轮枝镰孢有丰富遗传多样性，致病力较强。从 16 省市分离鉴定的玉 米穗腐病致病镰孢菌中选取代表性菌株，利用SSR 和VNTR 分子标记，结合RPB2 、TEF-1α 和 β-tubulin 等3 个基因的序列差异，对53 株拟轮枝镰孢和45 株禾谷镰孢复合种菌群的遗传结构进 行分析，表明两个镰孢菌种均显示出较高遗传变异性和多样性。在禾谷镰孢复合种中共检测到多 态性位点数 39 个，等位位点数48 个，多态性条带比率为 91.67%，每对引物扩增出多态性条带 2~4 条；禾谷镰孢复合种7 个地理群体平均Nei’s 遗传多样性指数和Shannon’s 信息指数分别为0.29 和0.41，7 个地理区域遗传相似度集中在0.6677~0.8797，遗传距离为0.1282~0.4039 。拟轮枝镰孢 七个地理群体的多态性位点数在13.00~43.00 之间，平均Shannon’s 信息指数和Nei’s 遗传多样性 指数分别为0.46 和0.32 。53 株拟轮枝镰孢的发病面积范围为2.8~27.0%，平均发病面积占比13.1%， 禾谷镰孢复合种的致病力由强到弱依次为 F. graminearum F. asiaticum F. boothii F. I meridionale 。通过比较3 个基因的序列差异，发现禾谷镰孢复合种的单核苷酸多态性位点比拟轮 枝镰孢多，分别为 141 和42 个。不同地理区域尤其是相邻区域菌群间存在较为频繁的基因交流 与交换。产毒化学型与菌种类型相关