蜡蚧轮枝菌蛋白激发子对菜豆抗菜豆修尾蚜的研究.pdfVIP

摘 要 修尾蚜是一种危害广泛的农作物害虫，昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌（V. lecanii）和球孢白 僵菌（B. bassiana ）是一种对环境友好、 靶标特异、 能够有效防治多种刺吸式昆虫的生物农 药。本研究测定了两株球孢白僵菌（B76 和B252 ）和两株蜡蚧轮枝菌（L2 和L5 ）对豆蚜的 防治作用。用 B76 、B252 、L2 和 L5 及其二元组合（L2+B76 、L2+B525 、B76+L5 和 L2+B76+B252+L5 ）的滤液和分生孢子制剂进行了三次生物测定。在滤液和分生孢子的比较 6 7 生物测定中，每个菌株的真菌滤液和分生孢子均为2ml 。采用三种不同浓度（即1×10 、1×10 8 -1 和1×10 conidia mL ）进行二元组合生物测定。结果表明，在所有处理的第8 天，对供试蚜 8 -1 虫的致病力最大。在孢子最高浓度为 1×10 conidia mL 的处理下，B76 菌株（85.3% ）和L2 菌株（77.9% ）的蚜虫死亡率均高于B252 （66.0% ）和L5 （60.9% ）。同样，B76 和L2 菌株的 二元组合表现出的蚜虫死亡率（90.5% ）明显高于其他组合，这表明B76 和L2 菌株是相互兼 容的，可以作为防治修尾蚜等害虫的新的生物防治工具。通过滤液与分生孢子的比较试验表 明，不同真菌滤液对修尾蚜的防治效果优于分生孢子处理。 从蜡蚧轮枝菌 L2 中提取了一种新的激发子蛋白 PevL1 ，该蛋白可诱导菜豆表现出对豆 蚜的抗性。蛋白激发子基因长度为 402 bp ，编码 134 个氨基酸的多肽，分子量为 14.46 kDa， 并能够诱导烟草叶片超敏反应（HR ）坏死。用三种不同浓度的PevL1 蛋白（即 24.0、31.0 和 50.0 µg mL-1）处理菜豆，并对豆类蚜虫进行体外生物测定。在蛋白激发子处理菜豆后，将新 形成（0-6h 龄）的蚜虫成虫接种于处理过的叶片。在不同温度条件下，使用不同浓度的激发 子，蚜虫的繁殖能力显著下降。在15℃、浓度为50.0 µg mL-1 的情况下，它的最小后代数为 7.7 。与蛋白激发子处理后的植株相比，蚜虫更倾向于在缓冲液处理过的叶片上生长。此外， 与缓冲液处理的植株相比，蛋白激发子处理的植株表现出对蚜虫的诱导抗性。用RT-qPCR 进 行的基因表达分析表明，在PevL1 处理的植株中，许多与植物防御相关的基因（即 SA 响应 基因和 JA 响 应基因）上调表达。总的来说，这项研究不仅证明了昆虫病原真菌菌株的致病 潜力，而且还分离出了一种可以诱发植物自身抗性拮抗豆蚜的新型蛋白激发子。 关键词：豆类修尾蚜，球孢白僵菌，蜡蚧轮枝菌，蛋白激发子 PevL1 ，菜豆 I ABSTRACT Bean aphid, M. japonica Matsumura, is a dangerous insect pest of a wide range of crops in the world. Entomopathogenic fungus V. lecanii and B. bassiana are high effective, environment friendly, and target specific biological control tools against many sucking insect pest species. This study determined the effect of two strains of B. bassiana (B76 and B252) and two strains of V. lecanii (L2 and L5) against bean aphid. Three bioassays were conducted with filtrate and conidial fo