昆虫病原真菌球孢白僵菌ARSEF2860及其分离的蛋白激发子PeBA1抗烟粉虱的活性分析.pdfVIP

摘 要 1. 烟粉虱是田间作物和温室中最具破坏性的害虫之一。本研究旨在 4 个不同温度条件下 （20 、24 、28 和 32°C ），通过表面喷洒的方式评估 2 种白僵菌菌株（BB-72 和 BB-252 ） 和 1 种蜡蚧轮枝菌（V-2 ）对烟粉虱的体外杀虫活性。使用三种不同的处理进行生物测定，分别 包括真菌菌株 BB-72 ，BB-252 和 V-2 的分生孢子浓度和滤液，以及它们的二元组合。处理一： 将取每种真菌菌株的 1.5 mL 培养滤液进行生物测定；处理二：使用每种菌株的不同浓度的分生 6 -1 7 -1 8 -1 孢子悬浮液（1×10 mL 、1×10 mL 和 1×10 mL ）进行生测，处理三：1 mL 分生孢子和1 mL 滤液的二元组合，例如 BB-72 × BB-72 （1:1），BB-252 × BB-252 （1:1）和 V2 × V2 （1:1）。 结果显示在处理后的第 12 天统计烟粉虱的累计死亡率。在 24°C 条件下使用最高浓度（1×108 mL-1 ）分生孢子处理，烟粉虱死亡率最高，BB-72 处理死亡率为 84 ％，BB-252 处理死亡率为 6 -1 77 ％和 V-2 处理死亡率为67 ％。而在32℃条件下使用最低浓度（1×10 mL ）分生孢子处理， 烟粉虱死亡率最低，BB-72 处理死亡率为 33 ％，BB-252 处理死亡率为 29 ％和 V-2 处理死亡率 为 19％。在24°C 条件下使用真菌滤液处理后第 12 天调查显示，BB-72 处理死亡率最高为 92 ％， 而在 32°C 条件下，V-2 滤液处理死亡率最低为 34 ％。此外，在二元组合的处理中，24°C 条件 下处理后的 12 天调查发现烟粉虱死亡率最高，BB-72 × BB-72 处理死亡率为 87％，BB-252×BB- 252 处理死亡率为 73 ％和V2×V2 处理死亡率为 65 ％。而在 32°C 条件下处理后的 12 天调查发 现死亡率最低，BB-72×BB-72 处理死亡率为 57 ％，BB-252×BB-252 处理死亡率为 50 ％和 V2×V2 处理死亡率为 39 ％。综上所述，在所有生物测定中，三种处理方式 BB-72 菌株的都表 现出最强的毒力，尤其是其滤液对烟粉虱的致死活力最佳。 2.许多具有生物防治潜力的真菌可以分泌激发植物对植食性害虫抗性的激活蛋白。本实验在 体外验证了来自白僵菌菌株 ARSEF-2860 的部分纯化蛋白对烟粉虱的亚致死作用。评价了不同 浓度的蛋白（1.5、3 和 6 µl/ml ）对生长在温室番茄上烟粉虱的寿命和繁殖力的影响。此外，通 过 RT-qPCR 方法检测与水杨酸（SA ）和茉莉酸（JA ）途径相关的关键基因的表达情况评估了 这种外源蛋白在植物防御机制中的潜在作用。研究结果表明，所有蛋白质浓度对烟粉虱的存活 和繁殖力均具有重大抑制作用。使用最高浓度的蛋白（6 µl/ml ）处理番茄叶片第 8 天进行调查， 烟粉虱的存活率最低（40 ％），而另外两种浓度的蛋白（3 和 1.5 µl/ml ）处理盐分是的存活率分 别为 61 ％和 70 ％。同样，6 µl 蛋白处理和对照相比繁殖率差异最大，对照组为每天每头雌虫产 3.3 个卵，而处理组每天每头雌虫仅产 1.8 个卵。此外，蛋白处理番茄叶片后，显著的上调了 SA 相关基因 PR1 ，BGL2 ，EDS1 和PAL 的表达，而对JA 相关基因LOX ，AOS ，OPR3 和AOC 的表达也有一定的上调作用。这些发现表明，通过外源应用从白僵菌中提取的激活蛋白，增强 了番茄植物对烟粉虱的系统抗性，并且有潜力作为一种针对烟粉虱和其他刺吸食害虫的新型生 物防治资源。 3.激发子是诱导植物抗性抵抗病原体和害虫的一类生物因子。众所周知 MAMPs 在先天植物 免疫中起着至关重要的作用。本研究的重点为评价从粉芽孢杆菌 NC6 菌株的蛋白激发子 PeBA1 在诱导激活番茄对烟粉虱的系统抗性中的作用。将三种不同浓度的激发子蛋白 PeBA1 （45.52、 26.80 和 18.36 µg/ml ）分别喷洒到 4 叶期的番茄植株上，然后接种烟粉虱成虫。结果