急性热应激对肉鸡肝脏氧化还原状态的影响及其机制.pdfVIP

摘 要 高温可造成肉鸡体内氧化还原稳态失衡，长期热暴露还可导致肉鸡发生氧化应激。前人研究 表明，慢性热应激引起的肉鸡生产性能下降，健康状况受损等现象都与机体氧化应激相关。但有 关急性热应激对肉鸡氧化还原状态的影响研究较少，热应激初期肉鸡调控自身氧化还原状态的分 子机制仍不完全清楚。本研究选取144 只的爱拔益加（AA ）肉鸡随机分为4 组，每组6 个重复， 每个重复6 只鸡，置于4 座环控舱中正常饲养。肉鸡34 日龄时，环控舱温度在1 小时内分别调 整为26 （对照组）、29、32 和35℃，持续6 小时后采集肉鸡血液和肝脏样品。重点关注急性热应 激对肉鸡血清生化指标、肝脏抗氧化能力、Nrf2 信号通路、内质网应激及细胞凋亡的影响，探究 以Nrf2 信号通路和UPR 反应为核心的抗氧化防御系统在热应激初期的变化规律，揭示肉鸡在应 激条件下调控自身氧化还原状态的分子机制。主要结果如下： （1）6 小时急性热应激可引起34 日龄肉鸡激素分泌增多，热休克蛋白表达上调，血清中抗 氧化酶活性升高。高温导致肉鸡处于应激状态，随着环境温度的升高，血清CORT、T3、T4 等激 素含量逐渐增加 （P 0.05 ），肝脏中HSP70 的基因和蛋白表达量极显著上调 （P 0.01），HSP90 的基因和蛋白表达量显著上调（P 0.05 ）。急性热应激还引起肉鸡血清中H O 显著增加（P 0.05 ）， 2 2 抗氧化酶SOD 和CAT 的活性显著升高（P 0.05 ），小分子抗氧化物质GSH 显著减少（P 0.05 ）。 （2 ）6 小时急性热应激可引起34 日龄肉鸡肝脏氧化还原状态发生变化，ROS 含量增多的同 时激活了抗氧化防御系统，提升机体的抗氧化能力。急性热应激条件下，肉鸡肝脏中H O 和蛋 2 2 白质氧化产物PC 的含量显著增加 （P 0.05 ），抗氧化酶SOD 的活性有升高的趋势 （P 0.07 ）， CAT 的活性随着温度升高逐渐升高 （P 0.05 ），同时GR 的活性也显著升高。与血清结果不同的 是，高温引起肉鸡肝脏GSH 的含量显著增加 （P 0.05 ）。 （3 ）6 小时急性热应激可引起34 日龄肉鸡肝脏Nrf2 信号通路被激活，并启动下游大量抗氧 化基因的表达，发挥其保护作用。通过检测肉鸡肝脏中目的基因与蛋白的表达情况发现，在急性 热应激条件下，Nrf2 及其负责调控的下游抗氧化基因如CAT、SOD1、SOD2、HO-1、NQO1、Prx3、 GCLc、GST 等的mRNA 表达量大都随温度升高而显著上调 （P 0.05 ），同时肉鸡肝脏中Nrf2 和 Prx3 的蛋白表达水平也随温度升高而显著上调 （P 0.05 ）。 （4 ）6 小时急性应激可引起34 日龄肉鸡肝脏发生未折叠蛋白反应，缓解内质网应激，阻止 细胞凋亡。高温可引起肉鸡肝脏中内质网应激标志物GRP78、GRP94 的mRNA 表达量和蛋白表 达量均显著上调 （P 0.05 ），进一步引起参与未折叠蛋白反应的PERK、IRE1 和XBP1 在mRNA 水平显著上调 （P 0.05 ）。而抗凋亡因子Bcl-2 的mRNA 表达水平显著上调 （P 0.05 ），BAK1 、 BIK、Caspase-3 与Caspase-9 等促凋亡因子在各组肉鸡肝脏中无显著变化 （P 0.05 ）。 综上，本研究结果表明在热应激初期，肉鸡可通过激活Nrf2 信号通路、UPR 反应等，调控 相关抗氧化基因和具有细胞保护功能的蛋白大量表达，提高抗氧化酶活性，加快谷胱甘肽的合成， 提升清除 ROS 的能力，使肉鸡在急性热应激条件下仍能维持适当的氧化还原状态，以缓解内质 网压力，阻止细胞凋亡的发生。 关键词：肉鸡，肝脏，急性热应激，氧化还原状态，Nrf2 信号通路 I A