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CaCo2 细胞培养 培养条件 37 C、5% CO2 及饱和湿度条件下培养 培养基的配制 （ 1） 称取  DMEM 粉末（GiBico NaHCO3 (分析纯 )  Cat No.12100-046）  1 包(13.4 g/L) 3.7 g/L HEPES (Sigma H3376)  1.3g/L Glucose (分析纯 )  3.5 g/L 溶于  1 L  重蒸水中，搅拌溶解，调  pH 至  7.4 2）加入青霉素（ 10 万 U/mL ）和链霉素（ 100 万 U/mL ）各一管非必须氨基酸 100 L （ 3）置于超净台内过滤除菌，将过滤好的培养液分装入小瓶内置于待用。  4 C 冰箱内 4）加入 10%胎牛血清（天津 TBD Cat No.TBD31HB ）即为完全培养基。 最终配成含 10%胎牛血清、青霉素（100 U/ml ）和链霉素（100 g/ml）的 DMEM 培养液 青、链霉素溶液的配制与消毒 具体操作均在超净台内完成。 青霉素 ( 华北制药股份有限公司 ) 是 80 万单位 / 瓶，用注射器加 8 mL 灭菌重蒸水。链霉素是 100 万单位 /瓶，加 10 ml( 华北制药股份有限公司 ) 灭菌重蒸水，即每毫升各为 10 万单位。 谷氨酰胺的配制与消毒 合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺， 其作用非常重要， 细胞需要谷氨