麦麸膳食纤维对人源肠道菌群作用机制的研究.pdfVIP

摘 要 人体内共生微生物的数量多达4×1014 个，其中肠道菌群占 90 % 以上，由此可见肠道微生物 对宿主十分重要。近年来，越来越多的研究表明，麦麸 （WB ）膳食纤维由己糖和戊糖组成，它可 以改善肠道菌群的结构和功能。聚合度（DP ）是影响膳食纤维理化结构的一大指标，目前有关WB 中不同DP 的己糖对肠道菌群影响的研究还较少。有学者认为，阿拉伯低聚木糖作为WB 膳食纤 维的主要成分，可能是WB 益生的关键，但WB 中富含的低聚木糖 （OX ）、木聚糖 （X ）在肠道 菌群中能否发挥重要作用目前尚不清楚。WB 中的阿魏酸 （FA ）含量在谷物中排名第二，可作为 较理想的发酵底物，用以挖掘肠道菌群中潜在的阿魏酸酯酶 （FAE ）。因此，本研究以WB 中不同 DP 的己糖以及戊糖为底物，进行体外厌氧发酵，通过理化性质分析（如产气，pH 值和短链脂肪 酸 （SCFAs ））和16S rRNA 扩增子分析，探究WB 膳食纤维与肠道菌群之间的联系，并通过宏基 因组分析，筛选WB 处理组肠道菌群中的FAE 基因。本文主要研究结果如下： 探究膳食纤维DP 与肠道菌群之间的关系，结果表明，DP 与主要代谢产物SCFAs 中的丁酸 产量呈正比，与双歧杆菌、拟杆菌、乳酸菌等公认的益生菌的相对丰度呈反比，与大肠志贺氏菌 （Escherichia-Shigella ）、梭杆菌属、多雷亚菌属（Dorea ）等多表现为致病性的微生物的相对丰度 呈正比。在羧甲基纤维素 （CMC ）体外发酵过程中，大肠志贺氏菌属的相对丰度显著增加，所以 应严格控制CMC 在食品中的用量。β-葡聚糖 （BG ）和低聚半乳糖 （GOS ）能够刺激多种对人体 有益的微生物生长。 WB 与X 和OX 体外发酵对肠道菌群的结构影响相似，三个处理组的气压分析、属水平的主 成分分析以及COG 功能分析显示出相同的变化趋势；此外，Venn 图分析显示，三种处理组共享 了80 %的核心物种分类单元 （OTU ）；显著性差异分析结果表明，多雷亚菌属（Dorea ），嗜胆菌 属（Bilophila ）等相对丰度偏低，并且富含于WB 处理组；富集菌群在系统发育分布分析中，仅 检测到五个进化分枝显著富集。 通过宏基因组测序分析，筛选肠道菌群中具有FAE 功能的基因。结果表明，WB 处理组抽提 的DNA 经过宏基因组测序，原始序列经过数据质控，获得优化序列条数共个，拼接 组装contigs 的序列条数为133192，从中筛选出11 个同时具有保守序列Gly-X-Ser-X-Gly 和催化 三联体Ser-His-Asp 特征的碱基序列，即潜在的FAE 基因。 关键词：体外发酵，麦麸，膳食纤维，短链脂肪酸，肠道菌群 I Abstract The number of human symbiotic microorganisms reaches 4 × 1014, and the human gut microbiota accounts for more than 90 %. Prior studies have shown that wheat bran dietary fiber is composed of hexose and pentose, which can improve the structure and function of gut microbiota. The degree of polymerization (DP) is a major indicator relating to the physical and chemical structure of dietary fiber. However, the influence of hexose with different DP on human gut bacteria warrants assessment. Some scholars believe that, as the main ingredients in wheat bran, arabinoxylan oligosaccharides may be the key to the beneficial effects o