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- 2020-11-04 发布于广东
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还原糖和总糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法
一、材料、主要仪器和试剂
1、材料 小麦面粉;精密 pH 试纸。
2、主要仪器;号管的光密度值。以光密度值为纵坐标,葡萄糖含量(mg)为横坐标,在坐标纸上绘出标 准曲线。
2.样品中还原糖和总糖的测定
还原糖的提取
准确称取 3.00g 食用面粉,放入 100mL 烧杯中,先用少量蒸馏水调成糊状,然后加入 50mL 蒸馏水,搅匀,置于 50℃恒温水浴中保温 20min,使还原糖浸出。将浸出液(含沉淀) 转移到 50mL 离心管中,于 4000r/min 下离心 5min,沉淀可用 20mL 蒸馏水洗一次,再离心, 将二次离心的上清液收集在 100mL 容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,混匀,作为还原糖待 测液。
总糖的水解和提取
准确称取 1.00g 食用面粉,放入 100mL 三角瓶中,加 15mL 蒸馏水及 10mL6MHCl, 置沸水浴中加热水解 30min(水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查)。待三角瓶中的水解液 冷却后,加入 1 滴酚酞指示剂,用 6mol/LNaOH 中和至微红色,用蒸馏水定容在 100mL 容 量瓶中,混匀。将定容后的水解液过滤,取滤液 10mL,移入另一 100mL 容量瓶中定容,混 匀,作为总糖待测液。
显色和比色
取 4 支 20mL 具塞刻度试管,编号,按表 2 所示分别加入待测液和显色剂,空
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