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细胞融合技术在动植物优良品种培育中的应用 09生物工程1班 刘蓓蕾 学号：200930741305 摘要：细胞融合是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。其中细胞融合技术在动植物优良品种培育中的应用尤为喜人。本文将进行介绍。 关键词：细胞融合 动植物细胞 杂交 品种培育 众所周知，每个物种都有各自的优良特性。当人们想把物质的几种特性组合在一起时，杂交产生了。通过杂交，能把各个物种优良的基因汇集在一起，并且表现出来。 说到杂交，首先，我们想到的是通过雌雄配子发生有性杂交。然而，很多远缘物种之间的杂交是很难成功的。这样的杂交往往表现为杂交不亲和，不能受精，或者胚胎早期败育。人们通过普通的有性杂交不能达到目的。 自然界中存在着细胞融合的现象。人们首先在病料组织中发现了由细胞融合产生的多核细胞, 紧接着发现在脊椎动物和无脊椎动物的正常细胞中也可发生细胞融合。随后在体外组 织培养中也发现了离体细胞的融合现象。自从发现活病毒可在体内介导癌细胞融合后, 人们又实现了灭活病毒促进动物异种细胞的融合, 从而打破了细胞融合的种属屏障, 推动细胞融合技术跃上新的台阶。体细胞的杂交逐渐成为可能，从而使得动植物远缘杂交育种成为了可能。 本文旨在揭示细胞融合技术在动植物远缘杂交育种方面的应用。 细胞融合的基本原理和方法 细胞融合基本原理 细胞融合又称体细胞杂交，是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生、形成新物种或新品种的技术。 对动植物细胞而言，细胞融合就是将两种不同物种的体细胞，经过各种处理得到原生质体，而后通过物理或化学的方法，诱导使之形成杂种细胞。再以适当的技术进行杂种细胞的分检和培养，促使杂种细胞分裂，生长为细胞株，实现基因在远缘物种间的转移。 细胞融合的方法 细胞融合首先要制得动植物的原生质体。如植物的细胞质膜外有一层细胞壁，为了得到原生质体就得先除去细胞壁。而动物细胞虽然没有细胞壁，但在融合前，也必须先获得单个分散的细胞。 细胞融合仙台病毒(HVJ)诱导法 1962年日本冈田善雄(Okada)偶然发现一种叫日本血凝性病毒HVJ，或称仙台病毒(Sendaivims)能引起艾氏腹水瘤细胞融合成多核细胞的现象。 在病毒法诱导细胞融合中，其有效促融因子在于细胞的膜，病毒膜片(甚至在病毒灭活或被超声打碎后)能使细胞间产生凝聚和融合，因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合。在动物细胞融合中，仙台病毒已成为产生细胞杂种的标准融合剂。 细胞融合PEG(聚乙二醇)诱导法 PEG在融合过程中起着稳定和诱导凝集作用，且对动植物的原生质体无损害。实验室常用的PEG平均相对分子质量在200~20000之间，一般1000以下为液体，1000以上为固体。此外还有许多其他的化学剂可使细胞凝集并融合，如磷酸盐、高级脂肪酸衍生物、脂质体等，不过这其中以聚乙二醇的效果较好。 1.2.3 细胞融合电场诱导法 细胞电融合是20世纪80年代发展起来的一门新兴的细胞工程和生物物理技术。以双向电泳和电子击穿细胞质膜的联合作用为基础, 对哺乳动物细胞、 植物原生质体的融合都有成功的结果。电融合技术的优点在于: 融合频率高, 是 PEG的 100倍; 操作简便, 快速; 对细胞无毒; 可在镜下观察融合过程。目前, 电融合技术已成为细胞融合的有效手段之一。 细胞融合技术在动植物育种方面的应用 2.1 细胞融合技术在动物育种方面的应用 动物细胞融合是从细胞水平来改变动物细胞的遗传性,用于改良培育动物新品种,缩短动物的育种过程。 目前，动物细胞融合人工受精技术已广泛应用于畜牧业生产，使优良公畜、禽的交配数与交配范围大为扩展，并且突破了动物交配的季节限制。 另外，可以从优良母畜或公畜中分离出卵细胞与精子，在体外受精，然后再将人工控制的新型受精卵种植到种质较差的母畜子宫内，繁殖优良新个体。对于生殖个体较少的动物同样可以利用这种方法，体外融合多个细胞同时在母体子宫发育,进而获得多个子代。 生物技术发展到今天，由于有了细胞融合，细胞成了科学家们随意发挥想象力的舞台，他们甚至可以把生命像积木那样组装起来，进行细胞水平上的生命组合游戏。1978年瑞士科学家埃勒门斯和美国的柯鲁斯将人的纤维肉瘤细胞与小鼠的畸胎瘤细胞融合后培育成含人体染色体的人造小鼠。而生命组合的一个最具代表性的游戏是美国耶鲁大学教授克莱白特·L·马格特和罗伯特·M·彼德斯的杰作。他们在黑毛鼠、白毛鼠、黄毛鼠的受精卵分裂成8个细胞时用特制的吸管把8细胞胚吸出输卵管，然后用一种酶将包裹在各个胚胎上的粘液溶解，再把这三种鼠的8细胞胚放在同一溶液中使之组装成一个具有24个细胞的“组装胚”。马格特和彼德斯把“组装胚”移植到一只老鼠的子宫内，不久，一只奇怪的组装鼠问世了，这只组装鼠全身披着黄、白、黑三种不同颜色的皮