分子生物学-02-2-第二章染色体与DNA-2复制.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 3 第二章 染色体与DNA 课程教案 授课题目：第2章 染色体与DNA复制3 教学时数： 2 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 理解：复制的机制和意义 了解：证明半保留复制的方法 各种不同复制的方式 教学重点： 重点阐明：复制的机制 重点指出：复制的起始在原核中的， 教学难点： 绝对难点：无 相对难点：无 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 教学内容与教学设计： 2.3 DNA的复制 2.3.1 DNA的半保留复制 核酸复制规律的一般猜想 1. Three Possible Modes of DNA Replication （1）Conservative replication（全保留复制）在DNA复制时，DNA并不需要解链，只是在复制位点解开几个碱基，亲代分子保持完整。在这个模型中，亲代分子并不需要解链 （2）Dispersive replication（分散复制） 亲代DNA分子先打成片段然后再互为模板，这样的话，亲代DNA片段分散在子代DNA分子中 （3）Semiconservative replication（半保留复制） Matthew Messelson Franklin Stahl Meselson-Stahl实验：1958年， Meselson和Stahl首先将大肠杆菌在含重同位素15N的培养基中培养约十五代，使所有细菌都被15N标记。然后移至只含有轻同位素14N的培养基中同步培养一代，二代，三代。分别提取DNA，作CsCl密度梯度离心，观察DNA的位置。 15N标记的DNA密度大于正常14N的DNA密度，在离心管较低的部位形成一条区带；正常的DNA应该在它的上面。 这种重标记的DNA在14N培养液中复制一代，重密度带消失了，而在比正常DNA稍低的地方形成一个带，即中间密度带（如果是半保留复制，在第一代中，DNA是密度杂交分子，两条链中一条链是亲代15N标记的重链，另一条是正常含14N的轻链，这样两条链形成密度上杂交的DNA分子）。在14N培养液中再复制一代，就会出现两条带，一条在中间密度区域，一条在轻密度区域。随着在14N培养液中培养的代数的增加，中间密度区的区带量逐渐减少，低密度区带的量逐渐增加，但并不出现新的区带。 这个实验证明了DNA的复制是半保留复制。 第0代 只有15N，第一代出现杂合分子，两代后出现等量的14N和14N-15N杂合分子。纯粹15N的分子没有的了，说明老链保留到了新链中了。 3. Semiconservative Replication in Eukaryotes Taylor-Woods-Hughes experiments： 1957, root tips of Vicia faba（蚕豆） Radioisotope 3H labeled thymidine Autoradiography（放射自显影） DNA半保留复制的生物学意义: DNA的半保留复制表明DNA在代谢上的稳定性，保证亲代的遗传信息稳定地传递给后代。 2.3.2 复制的起点方向和速度 DNA复制在生物细胞中要从DNA分子上特定位置开始。这个特定的位置就称为复制起点(Origin of replication)，用ori表示。 大肠杆菌E.coli ：复制速度 37 ℃ 0.5 h Multiple Origins in Eukaryotes： 复制速度 mammalian cell，500-5000 bp/min 复制的多模式 2.3.3复制的几种主要方式page40 “复制方式”不同于“复制机制” 线性DNA的复制： 典型的复制叉式的复制 环状DNA的复制： θ复制 滚环复制 D环复制 2.3.3 DNA复制的几种主要方式 1. 线性DNA双链的复制 特点在于： 1、多个起点，起点都不在线性DNA的端点（末端），而是在内部 2、采用复制叉式的双向复制，两个复制叉，两个方向，有先导链和后随链之分 3、末端的复制采用特殊的3种方式（后面讲） 4、真核生物采用的复制方式： 2. 环状DNA双链的复制 θ复制:首先由J.Carins 从大肠杆菌中观察到,又称为 Carins