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冰冻切片免疫组化步骤 1. 需要准备的材料 APES 包被的载玻片 PBS （pH7.4） 4%多聚甲醛 PBST （含Tween-20） PBST-G （含0.3mol/L 甘氨酸） 2. 冰冻切片 取出组织块放于软塑料盖或特制的小盒内， 之后将其缓慢平放于盛有液氮的 小杯内，让盒底部接触液氮（小盒及组织块切勿浸入液氮内） ，大约 10-20 秒组 织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置于 -80℃冰箱储存备用，或置于恒温切 片机冰冻切片。 切片厚度 4-8 um (5 um) ，对于免疫组化的需要用 APES 包被的载玻片， 以增 加组织片的粘附性。 切片后如不立即染色，必须吹干，储存于低温冰箱内保存。 3. 免疫组化染色步骤 固定： 取出切片，室温放置 5mins 。用 4% 的多聚甲醛 PBS 溶液室温固定 15mins，PBS 冲洗三次（冲洗可以采用侧斜淋洗，也可至于平皿中摇晃）