分子生物学-04-2-第二章染色体与DNA-5修复.docVIP

PAGE 郜刚分子生物学教案 教学单元教案格式 4 第二章 染色体与DNA 课程教案 授课题目：第2章第4节 修复 教学时数： 2 授课类型： eq \o\ac(□,√) 理论课 □ 实践课 教学目的、要求： 理解：DNA修复的过程及其意义 深入了解：D 深入掌握：原理、过程 了解：原理 教学重点： 重点阐明：过程 重点指出： 教学难点： 绝对难点： 相对难点： 教学方法和手段： 老师讲授为主：讲授 视频演示 PPT演示 讨论。以电脑幻灯片边演示边讲述为主，（白板课件）辅以板书（黑板板书） 学生回答问题为辅：（如时间等条件许可的情况下） 注：以下内容按实际需要进行取舍 要求有多媒体，因为信息量大，许多结构图需要媒体放映，效果才好 1 复习：DNA复制的大致过程 1、 双链解开 2、 引发体形成 3、延伸 4、 终止 冈崎的发现 DNA聚合酶的结构特点：双组分不对称 两个核心酶各负责合成一条链 半不连续复制模型 3、几种复制方式 线性DNA的复制： 复制叉式的复制 环状DNA的复制： θ复制 滚环复制 D环复制 需要特殊引物或者不需要引物的复制 1. 线性DNA双链的复制 特点： 1、多个起点，起点都不在线性DNA的端点（末端），而是在内部 2、采用复制叉式的双向复制，两个复制叉，两个方向，有先导链和后随链之分 3、末端的复制采用特殊的方式（后面讲） 4、真核生物采用的复制方式： 2. 环状DNA双链的复制 多数环状DNA采用的复制方式 复制叉式复制，两个复制叉，双向等速或者不等速复制 有先导链和后随链之分 3. 滚环复制 如：ΦΧ174的双链环状DNA复制型（RF） （1）模板链和新合成的链分开; （2）不需RNA引物，新生链在正链3‘－OH上共价延伸延伸 （3）只有一个复制叉;复制是单向的 4. D环复制 单向复制的特殊方式 线粒体DNA、叶绿体DNA 两条链的复制高度不对称 一个或者多个起点 没有先导链和后随链之分 5.用蛋白质做引物的复制 腺病毒 腺病毒的DNA复制首先是以5′端结合有pTP的dCMP作为引物，以3′端的末端反向重复序列（ITR）为模板，进行链置换（strand displacement）合成，置换出的单链分子可以自我退火环化，形成锅柄样环形分子，然后这种环形分子再以相同的机制合成出子代双链DNA分子。 6. DNA复制的调控 自学教材50-51页 补充一种新的调控模式： （4）细菌(E.coli)DNA每个细胞周期复制一次可能受OriC甲基化的控制 纠正教材上的一个说法p49表2-12 真核生物DNA聚合酶的功能： DNA聚合酶α：负责起始两条新链的合成，引物是由引发酶合成的 DNA聚合酶β ：负责修复 DNA聚合酶δ ：先导链的延伸（主要的复制功能） DNA聚合酶ε ：可能负责后随链的延伸 DNA聚合酶γ ：负责线粒体中DNA的复制 2.17 DNA的修复（自学为主） DNA修复系统 功能 错配修复 甲基化指导的错配修复 碱基切除修复 切除突变的碱基 核甘酸切除修复 重组修复 修复被破坏的DNA 复制后利用重组酶修复 DNA直接修复 修复嘧啶二体或甲基化DNA 1. 甲基化指导的错配修复 关键：Dam甲基化酶使母链位于5’ 2、碱基切除修复 糖甘水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-β-糖苷键处切下来，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点，由AP内切酶来完成 →→→ 3、核苷酸切除修复 1）通过特异的核酸内切酶识别损伤部位 2）由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸 3） DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 4）DNA连接酶将切口补平 4 、DNA的直接修复 在DNA光解酶的作用下将环丁烷胸腺嘧啶二体和6-4光化物还原成为单体 甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对 DNA的转座（自学） 作业布置： 1、上海生化所1998年分子遗传学试题： DNA修复系统的作用是保证DNA序列不发生任何变化（） 1、线性DNA复制时，下列哪一种酶是不需要的？ A DNA指导下的DNA聚合酶 B DNA连接酶 C 拓扑异构酶 D 解链酶 E 限制性内切酶 2、合成DNA的原料是 A dNMA B dNDP C dNTP D NTP E NMP 4、DNA复制中的引物是 A 由DNA为模板合成的DNA片段 B 由DNA为模板合成的RNA片段 C 由RNA为模板合成的DNA片段