传染病学-综合实验报告.pdfVIP

华南农业大学实验报告 华南农业大学实验报告 实验项 目名称： 细菌性疾病的微生物学诊断及防治 实验项 目名称： 细菌性疾病的微生物学诊断及防治 所属课程名称： 兽医传染病学实验 A 所属课程名称： 兽医传染病学实验 A 学生姓名：肖蕊 学号： 201130870214 专业年级： 11 级历史文化旅游 （兽医第 学生姓名：肖蕊 学号： 201130870214 专业年级： 11 级历史文化旅游 （兽医第 二专业） 二专业） 成绩： 成绩： 1 实验目的 1 实验目的 观察细菌性疾病的临床症状和病理解剖变化 观察细菌性疾病的临床症状和病理解剖变化 掌握细菌性疾病的微生物学诊断方法及防治措施 掌握细菌性疾病的微生物学诊断方法及防治措施 2 实验材料和方法 2 实验材料和方法 2.1 实验材料 2.1 实验材料 实验动物 、血清琼脂平板、营养肉汤 ，酒精灯、生化发酵管。药敏试纸、剪刀、镊子等 实验动物 、血清琼脂平板、营养肉汤 ，酒精灯、生化发酵管。药敏试纸、剪刀、镊子等 2.2 实验方法 2.2 实验方法 2.2.1 临床症状观察 2.2.1 临床症状观察 观察动物的精神状态、皮肤、被毛、粪便、体温等情况 观察动物的精神状态、皮肤、被毛、粪便、体温等情况 2.2.2 病理剖检变化 2.2.2 病理剖检变化 观察动物各脏器的病理变化，包括心、肺、肝、脾、肾、肠、淋巴结等。看有没有出 观察动物各脏器的病理变化，包括心、肺、肝、脾、肾、肠、淋巴结等。看有没有出 血、坏死等病变 血、坏死等病变 2.2.3实验室诊断 2.2.3实验室诊断 ①细菌分离培养 ①细菌分离培养 无菌取病兔病变组织，如肺、肝、脾或体液、分泌物及局部病灶的渗出液，接种血清营养 无菌取病兔病变组织，如肺、肝、脾或体液、分泌物及局部病灶的渗出液，接种血清营养 琼脂或麦康凯琼脂，将培养皿标记后置于37℃温箱，培养24小时后观察结果。 琼脂或麦康凯琼脂，将培养皿标记后置于37℃温箱，培养24小时后观察结果。 ② 涂片、染色、镜检 ② 涂片、染色、镜检 对于液体病料，可用无菌接种环取一环液体病料在载玻片上涂抹成适当大小的薄层即可；对 对于液体病料，可用无菌接种环取一环液体病料在载玻片上涂抹成适当大小的薄层即可；对 1  1  于实质脏器，可用镊子夹持病变组织，然后用灭菌剪刀剪取一小块，夹出后将其新鲜切面在 于实质脏器，可用镊子夹持病变组织，然后用灭菌剪刀剪取一小块，夹出后将其新鲜切面在 载玻片上压印即成触片。 载玻片上压印即成触片。 革兰氏染色法染色： 革兰氏染色法染色： 1.涂片经火焰固定，加1液 （结晶紫溶液）染1-2分钟，用清水冲去染液； 1.涂片经火焰固定，加1液 （结晶紫溶液）染1-2分钟，用清水冲去染液； 2.加第2液 （碘液）染1-2分钟，水洗； 2.加第2液 （碘液）染1-2分钟，水洗； 3.加第3液 （脱色液），不时摇动玻片约 10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗； 3.加第3液 （脱色液），不时摇动玻片约 10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗； 4.加第4液 （复染液），染1分钟，水洗； 4.加第4液 （复染液），染1分钟，水洗； 5.干后油镜镜检。结果判断：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 5.干后油镜镜检。结果判断：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。 （注意：1.严格掌握脱色时间，革兰氏阳性菌脱色时间过长易误认为革兰氏阴性菌，脱色时间过 （注意：1.严格掌握脱色时间，革兰氏阳性菌脱色时间过长易误认为革兰氏阴性菌，脱色时间过 短，革兰氏阴性菌易误认为革兰氏阳性菌；2.选用18至24小时菌龄的细菌为宜，如细菌太老， 短，革兰氏阴性菌易误认为革兰氏阳性菌；2.选用18至24小时菌龄的细菌