无菌检验统一标准操作作业规程SOP.docVIP

文件名称 无菌检验标准操作规程（SOP） 页码：1/5 文件编号 YZ-Q3(z)-ZL-10- 版 次 第三版 制 定 审 核 批 准 制订日期 审核日期 同意日期 颁发部门 颁发数量 生效日期 分发单位 目标：制订无菌检验标准操作规程，确保检验操作正确。 范围：本标准适适用于本企业大容量注射剂无菌检验操作。 责任者：质管部、化验室主任、QC检验员 内容： 1、标准依据：《中国药典》 二部附录XI H。 2、简述：无菌检验方法系用于检验药品是否无菌一个方法。检验项目包含需气菌、厌气菌及真菌检验。若供试品符合该项检验方法相关要求，仅表明了在该检验条件下未发觉微生物污染。 3、环境要求：该项检验应在环境洁净度万级（C级）背景下局部百级（A级）单向流区域内或隔离系统中进行。其全过程必需严格遵守无菌操作。预防微生物污染，但所采取方法不得影响供试品中微生物检出。操作前环境洁净度应经验证。日常检验需对试验环境进行监控。 5、方法验证：进行该项检验前应根据《无菌检验方法验证规程》确定该方法适用性。 4、人员要求：无菌检验人员必需含有微生物专业知识，并经过无菌技术培训。 6、检验数量及检验量： 6.1、接种每种培养基所需最少检验数量:2%或10个（取较少者），供试品无菌检验若采取薄膜过滤法，应增加1/2最小检验数量作阳性对照用；若采取直接过滤法，应增加供试品无菌检验时每个培养基容器接种样品量作阳性对照用。 6.2、每支供试品接入每种培养基最少许:半量（100ml≤V≤200ml），采取薄膜过滤法时，检验量应不少于直接接种供试品总接种量，只要供试品特征许可，应将全部容器内全部内容物过滤。 7、细菌培养温度为30～35℃，真菌培养温度为23～28 8、仪器用具：垂直层流超净工作台、生化培养箱、电热恒温水浴箱、显微镜、离心机、双碟、试管、三角瓶、刻度离心管、注射器（针头）、剪刀、镊子、注射器盒、75％酒精棉球、紫外光灯365nm、真空泵、一次性使用集菌培养器。 9、消毒剂配制： 9.1、75％乙醇溶液（配制酒精棉球用）。 9.2、0.2％新洁尔灭溶液（配制消毒棉球用）。 9.3、2％来苏尔溶液（配制消毒棉球用）。 10、试剂及培养基配制： 10.1、0.1％蛋白胨水溶液：取蛋白胨1.0g，加水1000ml,微温使溶解，滤清，调整PH值至7.1±0.2，分装，灭菌。 10.2、pH7.0灭菌氯化钠－蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g、氯化钠4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml微温溶解，滤清，分装，灭菌。 10.3、依据供试品特征，可选择其它经验证适宜溶液作为稀释液、冲洗液。如需要，可在上述稀释液或冲洗液灭菌前或灭菌后加入表面活性剂或中和剂。 10.4、硫乙醇酸盐流体培养基：按商品说明称取培养基，配制，摇匀，分装，按培养基说明高压灭菌，保留备用。分装容器应合适，其装量和容器高度百分比应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超出培养基深度1/2。供试品接种前，培养基氧化层高度不得超出培养基深度1/5，不然须经100℃ 10.5、改良马丁培养基：取商品干燥培养基28.5g，加水1000ml，加热溶解，分装，121℃ 10.6、选择性培养基： 按上述硫乙醇酸盐流体培养基或改良马丁培养基处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适量中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法验证试验 10.7、营养肉汤培养基：按商品说明称取培养基，配制，加热，溶解，分装，按培养基说明高压灭菌，保留备用。 10.8、营养琼脂培养基：取商品干燥培养基3.4g，加蒸馏水1000ml，加热溶解分装，121℃ 10.9、改良马丁琼脂培养基：取商品干燥培养基制备或按改良马丁培养基处方及制法，加入14.0g琼脂，调整PH值使灭菌后PH值为6.4±0.2，分装，121℃ 10.10、制备好培养基应保留在2～25℃ 11、试验前准备工作 11.1、用具洗刷 11.1.1、玻璃器皿：如试管、量筒、移液管、刻度吸管、离心管、三角瓶、双碟等用清洁液浸泡，用流水洗涤，再用蒸馏水洗涤4 11.1. 11.1.3、剪刀、镊子用水及去污粉洗涤，用水冲洗洁净，再用蒸馏水洗涤 11.1. 11.1.5、洁净服、裤、帽子、口罩等用水洗涤洁净后，晾干。 11.2、用具包扎及灭菌 11.2.1、移液管、刻度吸管在管口上端内，松松塞入少许脱脂药品，然后每支管用白纸严密卷好，再用两层牛皮纸一起包扎。 11.2.2、洗涤洁净注射器及适配针头各部件和剪刀、镊子一并入垫有纱布铝盒内，一层层放好，盖上纱布，将铝盒盖好，用牛皮纸包扎。 11.2.3、试管、三角瓶等在管（瓶）口塞上纱布棉纱用牛皮纸包装严密。 11.2.6、将洁净服、等用布口袋配套装入，扎紧口袋，用牛皮纸包扎好。 11.2.7、